生物化学与生物物理进展
生物化學與生物物理進展
생물화학여생물물리진전
PROGRESS IN BIOCHEMISTRY AND BIOPHYSICS
2007年
8期
830-835
,共6页
宋存先%张琳华%张超%LEVY RJ
宋存先%張琳華%張超%LEVY RJ
송존선%장림화%장초%LEVY RJ
抗DNA抗体%质粒DNA%阳离子脂质体%三元复合纳米基因载体
抗DNA抗體%質粒DNA%暘離子脂質體%三元複閤納米基因載體
항DNA항체%질립DNA%양리자지질체%삼원복합납미기인재체
基因治疗是未来临床医学最具潜力的治疗方式,目前阻碍临床基因治疗发展的主要因素是缺乏安全和高效的基因载体,因此研究理想的非病毒转基因载体具有重要的意义.构建了由质粒DNA(D)-抗DNA抗体(A)-阳离子脂质体(C)组成的三元复合纳米基因载体(DAC),研究表明,三组分在磷酸缓冲液中可通过分子组装形成复合纳米胶束,DAC在细胞培养中表现出显著高效的基因表达,DAC在血管平滑肌细胞中的基因转染效率比不含抗DNA抗体的二元组合(DC)高4倍,比不含阳离子脂质体的二元组合(DA)约高11倍.激光共聚焦荧光显微观察证明,DAC细胞摄取量和DNA进入细胞核的量均明显高于对照组,而DC二元组合(不含抗DNA抗体)的DNA很少进入细胞核,细胞在DAC存在下生长正常.未发现细胞毒性.研究结果提示,DAC的作用机理主要是三元复合胶束中DNA的装载量比二元载体大得多,抗DNA抗体与阳离子脂质体的协同作用明显有利于DNA被细胞摄取和胞吞,从而提高了基因的转染和表达.
基因治療是未來臨床醫學最具潛力的治療方式,目前阻礙臨床基因治療髮展的主要因素是缺乏安全和高效的基因載體,因此研究理想的非病毒轉基因載體具有重要的意義.構建瞭由質粒DNA(D)-抗DNA抗體(A)-暘離子脂質體(C)組成的三元複閤納米基因載體(DAC),研究錶明,三組分在燐痠緩遲液中可通過分子組裝形成複閤納米膠束,DAC在細胞培養中錶現齣顯著高效的基因錶達,DAC在血管平滑肌細胞中的基因轉染效率比不含抗DNA抗體的二元組閤(DC)高4倍,比不含暘離子脂質體的二元組閤(DA)約高11倍.激光共聚焦熒光顯微觀察證明,DAC細胞攝取量和DNA進入細胞覈的量均明顯高于對照組,而DC二元組閤(不含抗DNA抗體)的DNA很少進入細胞覈,細胞在DAC存在下生長正常.未髮現細胞毒性.研究結果提示,DAC的作用機理主要是三元複閤膠束中DNA的裝載量比二元載體大得多,抗DNA抗體與暘離子脂質體的協同作用明顯有利于DNA被細胞攝取和胞吞,從而提高瞭基因的轉染和錶達.
기인치료시미래림상의학최구잠력적치료방식,목전조애림상기인치료발전적주요인소시결핍안전화고효적기인재체,인차연구이상적비병독전기인재체구유중요적의의.구건료유질립DNA(D)-항DNA항체(A)-양리자지질체(C)조성적삼원복합납미기인재체(DAC),연구표명,삼조분재린산완충액중가통과분자조장형성복합납미효속,DAC재세포배양중표현출현저고효적기인표체,DAC재혈관평활기세포중적기인전염효솔비불함항DNA항체적이원조합(DC)고4배,비불함양리자지질체적이원조합(DA)약고11배.격광공취초형광현미관찰증명,DAC세포섭취량화DNA진입세포핵적량균명현고우대조조,이DC이원조합(불함항DNA항체)적DNA흔소진입세포핵,세포재DAC존재하생장정상.미발현세포독성.연구결과제시,DAC적작용궤리주요시삼원복합효속중DNA적장재량비이원재체대득다,항DNA항체여양리자지질체적협동작용명현유리우DNA피세포섭취화포탄,종이제고료기인적전염화표체.
