生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2007年
1期
32-34
,共3页
涂向东%邱龙翔%吴玉水%连云宗%程烽%朱忠勇
塗嚮東%邱龍翔%吳玉水%連雲宗%程烽%硃忠勇
도향동%구룡상%오옥수%련운종%정봉%주충용
EB病毒%gp85%融合表达%抗原性
EB病毒%gp85%融閤錶達%抗原性
EB병독%gp85%융합표체%항원성
目的:利用大肠杆菌BL21诱导表达GST-gp85融合蛋白,进行动物免疫制备多克隆抗体.方法:通过PCR反应从EB病毒转染的绒猴淋巴细胞系B95-8细胞中获得了gp85 BXLF2基因,将此基因克隆到大肠杆菌表达载体pGEX-5T,得到阳性克隆pGEX5T-85.转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组蛋白,表达产物经SDS-PAGE分析、尿素变性、复性和亲和层析纯化,并用初步纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠.结果:SDS-PAGE可见在相对分子质量约100 000处有蛋白条带,Western印迹表明该蛋白可与免疫的BALB/c小鼠血清及鼻咽癌血清起特异性反应.结论:在大肠杆菌细胞中成功表达了GST-gp85融合蛋白,该蛋白具有较好的抗原性和免疫原性.
目的:利用大腸桿菌BL21誘導錶達GST-gp85融閤蛋白,進行動物免疫製備多剋隆抗體.方法:通過PCR反應從EB病毒轉染的絨猴淋巴細胞繫B95-8細胞中穫得瞭gp85 BXLF2基因,將此基因剋隆到大腸桿菌錶達載體pGEX-5T,得到暘性剋隆pGEX5T-85.轉化大腸桿菌BL21,IPTG誘導錶達重組蛋白,錶達產物經SDS-PAGE分析、尿素變性、複性和親和層析純化,併用初步純化的蛋白免疫BALB/c小鼠.結果:SDS-PAGE可見在相對分子質量約100 000處有蛋白條帶,Western印跡錶明該蛋白可與免疫的BALB/c小鼠血清及鼻嚥癌血清起特異性反應.結論:在大腸桿菌細胞中成功錶達瞭GST-gp85融閤蛋白,該蛋白具有較好的抗原性和免疫原性.
목적:이용대장간균BL21유도표체GST-gp85융합단백,진행동물면역제비다극륭항체.방법:통과PCR반응종EB병독전염적융후림파세포계B95-8세포중획득료gp85 BXLF2기인,장차기인극륭도대장간균표체재체pGEX-5T,득도양성극륭pGEX5T-85.전화대장간균BL21,IPTG유도표체중조단백,표체산물경SDS-PAGE분석、뇨소변성、복성화친화층석순화,병용초보순화적단백면역BALB/c소서.결과:SDS-PAGE가견재상대분자질량약100 000처유단백조대,Western인적표명해단백가여면역적BALB/c소서혈청급비인암혈청기특이성반응.결론:재대장간균세포중성공표체료GST-gp85융합단백,해단백구유교호적항원성화면역원성.
