中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2006年
2期
142-146
,共5页
高玉龙%辛九庆%李媛%王砚范
高玉龍%辛九慶%李媛%王硯範
고옥룡%신구경%리원%왕연범
牛传染性胸膜肺炎%丝状支原体丝状亚种SC型%脂蛋白%LppQ%分子特征
牛傳染性胸膜肺炎%絲狀支原體絲狀亞種SC型%脂蛋白%LppQ%分子特徵
우전염성흉막폐염%사상지원체사상아충SC형%지단백%LppQ%분자특정
根据已发表的丝状支原体丝状亚种SC型(MmmSC)脂蛋白Q(LppQ)基因序列设计并合成一对引物,利用PCR扩增方法,从我国不同省区的MmmSC分离株HVRI-Ⅹ、Ben Ⅰ、Qmg Ⅰ、Mu Ⅰ和模式株pG1中获得了LppQ基因1 303 bp的片段,将该片段克隆到PMD18-T载体上,通过对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定,证明得到了含有目的基因片段的阳性重组质粒.采用Sanger's双脱氧末端终止法对插入片段进行核苷酸序列测定,获得了HVRI-Ⅹ、Ben Ⅰ、Qmg Ⅰ、Mu Ⅰ株和模式株PG1 LppQ基因核苷酸序列.核苷酸序列比较结果显示,国内4个MmmSC分离株与GenBank公布的LppQ基因核苷酸序列同源性均在99.7%以上,氨基酸序列同源性均在99%以上;与模式株PG1的核苷酸序列同源性在99.7%以上,氨基酸序列同源性均在99.3%以上.国内4个MmmSC分离株之间的核苷酸序列同源性均在99.7%以上,氨基酸序列同源性均在99.3%以上.对HVRI Ⅹ株LppQ基因氨基酸亲水性和蛋白表面可能性进行了分析,证实LppQ N末端富含亲水氨基酸,比C末端更有可能定位在蛋白表面.
根據已髮錶的絲狀支原體絲狀亞種SC型(MmmSC)脂蛋白Q(LppQ)基因序列設計併閤成一對引物,利用PCR擴增方法,從我國不同省區的MmmSC分離株HVRI-Ⅹ、Ben Ⅰ、Qmg Ⅰ、Mu Ⅰ和模式株pG1中穫得瞭LppQ基因1 303 bp的片段,將該片段剋隆到PMD18-T載體上,通過對所得到的重組質粒進行酶切分析、PCR鑒定,證明得到瞭含有目的基因片段的暘性重組質粒.採用Sanger's雙脫氧末耑終止法對插入片段進行覈苷痠序列測定,穫得瞭HVRI-Ⅹ、Ben Ⅰ、Qmg Ⅰ、Mu Ⅰ株和模式株PG1 LppQ基因覈苷痠序列.覈苷痠序列比較結果顯示,國內4箇MmmSC分離株與GenBank公佈的LppQ基因覈苷痠序列同源性均在99.7%以上,氨基痠序列同源性均在99%以上;與模式株PG1的覈苷痠序列同源性在99.7%以上,氨基痠序列同源性均在99.3%以上.國內4箇MmmSC分離株之間的覈苷痠序列同源性均在99.7%以上,氨基痠序列同源性均在99.3%以上.對HVRI Ⅹ株LppQ基因氨基痠親水性和蛋白錶麵可能性進行瞭分析,證實LppQ N末耑富含親水氨基痠,比C末耑更有可能定位在蛋白錶麵.
근거이발표적사상지원체사상아충SC형(MmmSC)지단백Q(LppQ)기인서렬설계병합성일대인물,이용PCR확증방법,종아국불동성구적MmmSC분리주HVRI-Ⅹ、Ben Ⅰ、Qmg Ⅰ、Mu Ⅰ화모식주pG1중획득료LppQ기인1 303 bp적편단,장해편단극륭도PMD18-T재체상,통과대소득도적중조질립진행매절분석、PCR감정,증명득도료함유목적기인편단적양성중조질립.채용Sanger's쌍탈양말단종지법대삽입편단진행핵감산서렬측정,획득료HVRI-Ⅹ、Ben Ⅰ、Qmg Ⅰ、Mu Ⅰ주화모식주PG1 LppQ기인핵감산서렬.핵감산서렬비교결과현시,국내4개MmmSC분리주여GenBank공포적LppQ기인핵감산서렬동원성균재99.7%이상,안기산서렬동원성균재99%이상;여모식주PG1적핵감산서렬동원성재99.7%이상,안기산서렬동원성균재99.3%이상.국내4개MmmSC분리주지간적핵감산서렬동원성균재99.7%이상,안기산서렬동원성균재99.3%이상.대HVRI Ⅹ주LppQ기인안기산친수성화단백표면가능성진행료분석,증실LppQ N말단부함친수안기산,비C말단경유가능정위재단백표면.
