中国人兽共患病杂志
中國人獸共患病雜誌
중국인수공환병잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2002年
5期
42-44
,共3页
卜玲毅%胡孝素%敬保迁%王雅静%马莹
蔔玲毅%鬍孝素%敬保遷%王雅靜%馬瑩
복령의%호효소%경보천%왕아정%마형
利什曼原虫%LACK%聚合酶链反应%克隆%表达%免疫印迹
利什曼原蟲%LACK%聚閤酶鏈反應%剋隆%錶達%免疫印跡
리십만원충%LACK%취합매련반응%극륭%표체%면역인적
目的在大肠杆菌中高效表达纯化杜氏利什曼原虫的LACK抗原.方法以本实验室的重组质粒T-LACK为模板,PCR扩增得到LACK抗原基因,与表达载体pQE31定向重组,转化到宿主菌M15中进行表达和纯化,并以SDS-PAGE和Western-blotting进行鉴定.结果 1.SDS-PAGE电泳检测,重组质粒pQE31-LACK的全菌蛋白没有出现明显的特异表达带,而纯化蛋白和包涵体溶解物在36kDa处均出现了特异的表达带.2.36kDa的纯化蛋白被抗利什曼原虫鼠血清清晰地识别.结论得到了高效表达的LACK纯化蛋白,并有免疫原性.
目的在大腸桿菌中高效錶達純化杜氏利什曼原蟲的LACK抗原.方法以本實驗室的重組質粒T-LACK為模闆,PCR擴增得到LACK抗原基因,與錶達載體pQE31定嚮重組,轉化到宿主菌M15中進行錶達和純化,併以SDS-PAGE和Western-blotting進行鑒定.結果 1.SDS-PAGE電泳檢測,重組質粒pQE31-LACK的全菌蛋白沒有齣現明顯的特異錶達帶,而純化蛋白和包涵體溶解物在36kDa處均齣現瞭特異的錶達帶.2.36kDa的純化蛋白被抗利什曼原蟲鼠血清清晰地識彆.結論得到瞭高效錶達的LACK純化蛋白,併有免疫原性.
목적재대장간균중고효표체순화두씨리십만원충적LACK항원.방법이본실험실적중조질립T-LACK위모판,PCR확증득도LACK항원기인,여표체재체pQE31정향중조,전화도숙주균M15중진행표체화순화,병이SDS-PAGE화Western-blotting진행감정.결과 1.SDS-PAGE전영검측,중조질립pQE31-LACK적전균단백몰유출현명현적특이표체대,이순화단백화포함체용해물재36kDa처균출현료특이적표체대.2.36kDa적순화단백피항리십만원충서혈청청석지식별.결론득도료고효표체적LACK순화단백,병유면역원성.
