中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2004年
5期
328-331
,共4页
余业东%梁红虎%孙彦伟%林琳%罗满林%刘镇明%戚一达
餘業東%樑紅虎%孫彥偉%林琳%囉滿林%劉鎮明%慼一達
여업동%량홍호%손언위%림림%라만림%류진명%척일체
套式PCR%PCV2检测%猪用弱毒疫苗
套式PCR%PCV2檢測%豬用弱毒疫苗
투식PCR%PCV2검측%저용약독역묘
参照Genbank已发表的猪圆环病毒2型的基因序列,取其比较保守的基因片段ORF2,利用引物设计软件Oli-go5.0设计两对PCV2型特异的引物,其中第一对引物扩增跨度为ORF2全基因片段,长度为702 bp,第二对引物扩增ORF2中间的一个小片段,跨度大小为494 bp.首先用第一对引物扩增阳性DNA,阳性DNA的浓度从10-1稀释到10-11,然后以第一次PCR产物为模板,用第二对引物进行PCR,发现这种套式PCR的方法比用普通PCR灵敏度提高102倍.同这种套式PCR方法对广东省市场上出售的几种猪用弱毒疫苗进行猪圆环病毒2型检测,结果发现这几种疫苗全部为阴性,本实验说明目前广东市场上出售的弱毒疫苗在制作过程中没有受到PCV2的污染,解除了广大猪场主的顾虑.
參照Genbank已髮錶的豬圓環病毒2型的基因序列,取其比較保守的基因片段ORF2,利用引物設計軟件Oli-go5.0設計兩對PCV2型特異的引物,其中第一對引物擴增跨度為ORF2全基因片段,長度為702 bp,第二對引物擴增ORF2中間的一箇小片段,跨度大小為494 bp.首先用第一對引物擴增暘性DNA,暘性DNA的濃度從10-1稀釋到10-11,然後以第一次PCR產物為模闆,用第二對引物進行PCR,髮現這種套式PCR的方法比用普通PCR靈敏度提高102倍.同這種套式PCR方法對廣東省市場上齣售的幾種豬用弱毒疫苗進行豬圓環病毒2型檢測,結果髮現這幾種疫苗全部為陰性,本實驗說明目前廣東市場上齣售的弱毒疫苗在製作過程中沒有受到PCV2的汙染,解除瞭廣大豬場主的顧慮.
삼조Genbank이발표적저원배병독2형적기인서렬,취기비교보수적기인편단ORF2,이용인물설계연건Oli-go5.0설계량대PCV2형특이적인물,기중제일대인물확증과도위ORF2전기인편단,장도위702 bp,제이대인물확증ORF2중간적일개소편단,과도대소위494 bp.수선용제일대인물확증양성DNA,양성DNA적농도종10-1희석도10-11,연후이제일차PCR산물위모판,용제이대인물진행PCR,발현저충투식PCR적방법비용보통PCR령민도제고102배.동저충투식PCR방법대광동성시장상출수적궤충저용약독역묘진행저원배병독2형검측,결과발현저궤충역묘전부위음성,본실험설명목전엄동시장상출수적약독역묘재제작과정중몰유수도PCV2적오염,해제료엄대저장주적고필.
