山东大学学报(医学版)
山東大學學報(醫學版)
산동대학학보(의학판)
JOURNAL OF SHANGDONG UNIVERSITY(HEALTH SCIENCES)
2003年
2期
109-111
,共3页
李长菲%张利宁%孙汶生%王振光%王晓燕%马春红
李長菲%張利寧%孫汶生%王振光%王曉燕%馬春紅
리장비%장리저%손문생%왕진광%왕효연%마춘홍
抗原,CD137%真核表达系统%基因工程
抗原,CD137%真覈錶達繫統%基因工程
항원,CD137%진핵표체계통%기인공정
目的:获得表达人可溶性CD137抗原的dhfr-CHO细胞株.方法:将CD137-hIgG1Fc-pCD-NA3重组质粒及pSV2-dhfr质粒,运用脂质体介导法共转染CHO细胞.用G418筛选出阳性克隆,MTX递增浓度诱导人可溶性CD137在dhfr-CHO细胞的表达.运用RT-PCR检测CD137 mRNA转录水平,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测人CD137可溶性蛋白在CHO细胞中的表达.结果:重组质粒转化细胞进行RT-PCR后,得到一大小为558bp的特异性条带,与人CD137胞膜外区一致;重组质粒转化细胞进行SDS-PAGE得到一大小约为37KDa的条带,与人CD137-hIgG1Fc融合蛋白大小基本一致.结论:获得了表达人可溶性CD137的dhfr-CHO细胞株,为获得纯化的CD137抗原、制备CD137单抗奠定了基础.
目的:穫得錶達人可溶性CD137抗原的dhfr-CHO細胞株.方法:將CD137-hIgG1Fc-pCD-NA3重組質粒及pSV2-dhfr質粒,運用脂質體介導法共轉染CHO細胞.用G418篩選齣暘性剋隆,MTX遞增濃度誘導人可溶性CD137在dhfr-CHO細胞的錶達.運用RT-PCR檢測CD137 mRNA轉錄水平,SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳檢測人CD137可溶性蛋白在CHO細胞中的錶達.結果:重組質粒轉化細胞進行RT-PCR後,得到一大小為558bp的特異性條帶,與人CD137胞膜外區一緻;重組質粒轉化細胞進行SDS-PAGE得到一大小約為37KDa的條帶,與人CD137-hIgG1Fc融閤蛋白大小基本一緻.結論:穫得瞭錶達人可溶性CD137的dhfr-CHO細胞株,為穫得純化的CD137抗原、製備CD137單抗奠定瞭基礎.
목적:획득표체인가용성CD137항원적dhfr-CHO세포주.방법:장CD137-hIgG1Fc-pCD-NA3중조질립급pSV2-dhfr질립,운용지질체개도법공전염CHO세포.용G418사선출양성극륭,MTX체증농도유도인가용성CD137재dhfr-CHO세포적표체.운용RT-PCR검측CD137 mRNA전록수평,SDS-취병희선알응효전영검측인CD137가용성단백재CHO세포중적표체.결과:중조질립전화세포진행RT-PCR후,득도일대소위558bp적특이성조대,여인CD137포막외구일치;중조질립전화세포진행SDS-PAGE득도일대소약위37KDa적조대,여인CD137-hIgG1Fc융합단백대소기본일치.결론:획득료표체인가용성CD137적dhfr-CHO세포주,위획득순화적CD137항원、제비CD137단항전정료기출.
