中国科学C辑
中國科學C輯
중국과학C집
SCIENCE IN CHINA (SERIES C)
2002年
5期
463-470
,共8页
马仲才%吴晓兰%曹明媚%潘卫%朱分禄%陈景山%戚中田
馬仲纔%吳曉蘭%曹明媚%潘衛%硃分祿%陳景山%慼中田
마중재%오효란%조명미%반위%주분록%진경산%척중전
噬菌体展示%随机肽库%脑源性神经营养因子%trkB%拮抗剂
噬菌體展示%隨機肽庫%腦源性神經營養因子%trkB%拮抗劑
서균체전시%수궤태고%뇌원성신경영양인자%trkB%길항제
脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)能够促进多种神经元的存活和分化, 在神经退行性疾病的治疗中具有广阔的应用前景, 但由于其分子量大而无法穿过血脑屏障, 限制了其临床应用. 以表达于NIH 3T3细胞上的BDNF受体trkB为靶分子, 从噬菌体展示的随机肽库中筛选与trkB有亲和力的小肽, 采用不表达trkB 的NIH 3T3细胞预吸附和最后一轮筛选以1μg/mL的BDNF竞争性洗脱策略, 使能与trkB天然构象结合、又能有效拮抗BDNF与trkB结合的特异性噬菌体得到了有效富集, 获得了5种trkB结合小肽, 它们有核心序列CRA/TXφXXφXXC(X代表随机残基, φ为T, L或I). 对展示有5种外源小肽的噬菌体进行了初步生物活性测定, 未发现有BDNF样活性, 反而能剂量依赖性地拮抗BDNF的生物功能. 依据其中一个克隆序列(C1)合成的肽也证实有拮抗BDNF的作用, 表明获得的5种小肽可能为trkB受体拮抗剂. 这些trkB拮抗性小肽在治疗神经母细胞瘤和慢性痛以及神经生物学研究中具有应用前景, 同时也为构建二级噬菌体展示肽库、继续筛选BDNF模拟小肽奠定了基础.
腦源性神經營養因子(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)能夠促進多種神經元的存活和分化, 在神經退行性疾病的治療中具有廣闊的應用前景, 但由于其分子量大而無法穿過血腦屏障, 限製瞭其臨床應用. 以錶達于NIH 3T3細胞上的BDNF受體trkB為靶分子, 從噬菌體展示的隨機肽庫中篩選與trkB有親和力的小肽, 採用不錶達trkB 的NIH 3T3細胞預吸附和最後一輪篩選以1μg/mL的BDNF競爭性洗脫策略, 使能與trkB天然構象結閤、又能有效拮抗BDNF與trkB結閤的特異性噬菌體得到瞭有效富集, 穫得瞭5種trkB結閤小肽, 它們有覈心序列CRA/TXφXXφXXC(X代錶隨機殘基, φ為T, L或I). 對展示有5種外源小肽的噬菌體進行瞭初步生物活性測定, 未髮現有BDNF樣活性, 反而能劑量依賴性地拮抗BDNF的生物功能. 依據其中一箇剋隆序列(C1)閤成的肽也證實有拮抗BDNF的作用, 錶明穫得的5種小肽可能為trkB受體拮抗劑. 這些trkB拮抗性小肽在治療神經母細胞瘤和慢性痛以及神經生物學研究中具有應用前景, 同時也為構建二級噬菌體展示肽庫、繼續篩選BDNF模擬小肽奠定瞭基礎.
뇌원성신경영양인자(brain-derived neurotrophic factor, BDNF)능구촉진다충신경원적존활화분화, 재신경퇴행성질병적치료중구유엄활적응용전경, 단유우기분자량대이무법천과혈뇌병장, 한제료기림상응용. 이표체우NIH 3T3세포상적BDNF수체trkB위파분자, 종서균체전시적수궤태고중사선여trkB유친화력적소태, 채용불표체trkB 적NIH 3T3세포예흡부화최후일륜사선이1μg/mL적BDNF경쟁성세탈책략, 사능여trkB천연구상결합、우능유효길항BDNF여trkB결합적특이성서균체득도료유효부집, 획득료5충trkB결합소태, 타문유핵심서렬CRA/TXφXXφXXC(X대표수궤잔기, φ위T, L혹I). 대전시유5충외원소태적서균체진행료초보생물활성측정, 미발현유BDNF양활성, 반이능제량의뢰성지길항BDNF적생물공능. 의거기중일개극륭서렬(C1)합성적태야증실유길항BDNF적작용, 표명획득적5충소태가능위trkB수체길항제. 저사trkB길항성소태재치료신경모세포류화만성통이급신경생물학연구중구유응용전경, 동시야위구건이급서균체전시태고、계속사선BDNF모의소태전정료기출.
