西北国防医学杂志
西北國防醫學雜誌
서북국방의학잡지
MEDICAL JOURNAL OF NATIONAL DEFENDING FORCES IN NORTHWEST CHINA
2002年
6期
421-423
,共3页
PE38%免疫毒素%肝细胞肝癌%单链抗体%表达
PE38%免疫毒素%肝細胞肝癌%單鏈抗體%錶達
PE38%면역독소%간세포간암%단련항체%표체
目的:构建绿脓杆菌外毒素PE38融合人源化鼠抗肝癌单链抗体(hscFv)原核表达载体,对其产物作初步鉴定,为肝癌的导向治疗奠定基础.方法:采用分子克隆技术,PCR法扩增PE38基因片段,克隆入 GST-融合蛋白表达载体pGEX-4T-1-hscFv中,重组克隆载体经酶切及DNA序列测定证实两片段连接正确,受IPTG诱导表达后,SDS-PAGE及Western blot分析GST融合蛋白结果.结果:成功构建免疫毒素表达载体pGEX-4T-1-hscFv-PE38(以下简称pGEXh-PE38);SDS-PAGE清晰显示Mr为90 000的目的蛋白条带,光密度薄层扫描提示表达量为11%, Western blot在相同位置显示蛋白印迹,证实载体构建及表达均正确.结论:利用基因重组技术,在原核细胞中表达重组免疫毒素hscFv-PE38,为尝试肝癌治疗试验的一条有效途径.
目的:構建綠膿桿菌外毒素PE38融閤人源化鼠抗肝癌單鏈抗體(hscFv)原覈錶達載體,對其產物作初步鑒定,為肝癌的導嚮治療奠定基礎.方法:採用分子剋隆技術,PCR法擴增PE38基因片段,剋隆入 GST-融閤蛋白錶達載體pGEX-4T-1-hscFv中,重組剋隆載體經酶切及DNA序列測定證實兩片段連接正確,受IPTG誘導錶達後,SDS-PAGE及Western blot分析GST融閤蛋白結果.結果:成功構建免疫毒素錶達載體pGEX-4T-1-hscFv-PE38(以下簡稱pGEXh-PE38);SDS-PAGE清晰顯示Mr為90 000的目的蛋白條帶,光密度薄層掃描提示錶達量為11%, Western blot在相同位置顯示蛋白印跡,證實載體構建及錶達均正確.結論:利用基因重組技術,在原覈細胞中錶達重組免疫毒素hscFv-PE38,為嘗試肝癌治療試驗的一條有效途徑.
목적:구건록농간균외독소PE38융합인원화서항간암단련항체(hscFv)원핵표체재체,대기산물작초보감정,위간암적도향치료전정기출.방법:채용분자극륭기술,PCR법확증PE38기인편단,극륭입 GST-융합단백표체재체pGEX-4T-1-hscFv중,중조극륭재체경매절급DNA서렬측정증실량편단련접정학,수IPTG유도표체후,SDS-PAGE급Western blot분석GST융합단백결과.결과:성공구건면역독소표체재체pGEX-4T-1-hscFv-PE38(이하간칭pGEXh-PE38);SDS-PAGE청석현시Mr위90 000적목적단백조대,광밀도박층소묘제시표체량위11%, Western blot재상동위치현시단백인적,증실재체구건급표체균정학.결론:이용기인중조기술,재원핵세포중표체중조면역독소hscFv-PE38,위상시간암치료시험적일조유효도경.
