p53缺失和突变对人肺癌细胞系恶性表型影响的比较
p53결실화돌변대인폐암세포계악성표형영향적비교
Study on the effects of p53 deletion and mutation on malignant phenotype of human lung cancer cell line
  • 万方数据
    中国肺癌杂志 중국폐암잡지
    CHINESE JOURNAL OF LUNG CANCER
    2002年 4期 245-249 ,共5页

    汪惠%赖百塘%李金照%杨学惠%张春彦%岳文涛%张洪涛%李曦%湛秀萍%王玥

    왕혜%뢰백당%리금조%양학혜%장춘언%악문도%장홍도%리희%담수평%왕모

    正义p53基因%反义p53基因%转染细胞%集落形成%裸鼠移植 正義p53基因%反義p53基因%轉染細胞%集落形成%裸鼠移植
    정의p53기인%반의p53기인%전염세포%집락형성%라서이식
    目的比较研究外源正义和反义p53对所转染细胞系恶性表型的影响.方法构建正义和反义p53 cDNA真核细胞表达载体pEGFP-p53(RS)和pEGFP-p53(AS),用Lipofectin介导转染801D细胞.PCR检测外源p53和neo基因.荧光显微镜检查转染细胞绿荧光蛋白.免疫组化染色检测突变蛋白表达.比较pEGFP-p53(AS)-801D和pEGFP-p53(RS)-801D的集落形成试验和裸鼠移植试验.用流式细胞术分析细胞周期.结果 PCR检测出外源p53和neo基因存在于细胞,细胞可见绿色荧光.免疫组化检测示pEGFP-p53(AS)-801D突变蛋白呈阴性,母系为阳性,表明反义p53能封闭突变p53蛋白表达.pEGFP-p53(RS)-801D和pEGFP-p53(AS) 801D细胞集落形成率和裸鼠移植成瘤性均降低,pEGFP-p53(RS)-801D更为明显.pEGFP-p53(AS)-801D细胞周期阻滞于G1期.结论在同一细胞背景下,p53缺失比p53突变对恶性增殖起更重要的作用.外源野生型p53在肿瘤细胞中可恢复重建其功能,外源反义p53可封闭突变蛋白表达,阻止细胞停留于G1期.
    목적비교연구외원정의화반의p53대소전염세포계악성표형적영향.방법구건정의화반의p53 cDNA진핵세포표체재체pEGFP-p53(RS)화pEGFP-p53(AS),용Lipofectin개도전염801D세포.PCR검측외원p53화neo기인.형광현미경검사전염세포록형광단백.면역조화염색검측돌변단백표체.비교pEGFP-p53(AS)-801D화pEGFP-p53(RS)-801D적집락형성시험화라서이식시험.용류식세포술분석세포주기.결과 PCR검측출외원p53화neo기인존재우세포,세포가견록색형광.면역조화검측시pEGFP-p53(AS)-801D돌변단백정음성,모계위양성,표명반의p53능봉폐돌변p53단백표체.pEGFP-p53(RS)-801D화pEGFP-p53(AS) 801D세포집락형성솔화라서이식성류성균강저,pEGFP-p53(RS)-801D경위명현.pEGFP-p53(AS)-801D세포주기조체우G1기.결론재동일세포배경하,p53결실비p53돌변대악성증식기경중요적작용.외원야생형p53재종류세포중가회복중건기공능,외원반의p53가봉폐돌변단백표체,조지세포정류우G1기.
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