免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2002年
3期
225-228
,共4页
洪海燕%赖春宁%冯健男%王建安%刘涛%戚中田%沈倍奋
洪海燕%賴春寧%馮健男%王建安%劉濤%慼中田%瀋倍奮
홍해연%뢰춘저%풍건남%왕건안%류도%척중전%침배강
pBV-220%RNA二级结构%蛋白表达%全基因合成
pBV-220%RNA二級結構%蛋白錶達%全基因閤成
pBV-220%RNA이급결구%단백표체%전기인합성
目的分析SD序列长度、基因起始码ATG和终止码TAA上下游处RNA的二级结构及密码子偏性等影响表达效率的主要因素,以期实现重组人干细胞因子在原核细菌中高效表达.方法分析并修改编码人SCF氨基酸的密码子,分段合成改造后的基因,PCR一次性完成拼接,将基因克隆到pBV-220载体上,诱导表达.结果天然人SCF基因在pBV-220载体的表达占菌体总蛋白的9.5%,基因改造后SCF占菌体总蛋白的27%,表达的蛋白能够为SCF的单克隆抗体所识别,初步纯化的sCF蛋白纯度大于80%,能够促进Mo7e细胞的增殖活性.结论密码子偏性是影响SCF在原核细菌中高效表达的主要因素,通过改变密码子偏性能过实现高效表达.
目的分析SD序列長度、基因起始碼ATG和終止碼TAA上下遊處RNA的二級結構及密碼子偏性等影響錶達效率的主要因素,以期實現重組人榦細胞因子在原覈細菌中高效錶達.方法分析併脩改編碼人SCF氨基痠的密碼子,分段閤成改造後的基因,PCR一次性完成拼接,將基因剋隆到pBV-220載體上,誘導錶達.結果天然人SCF基因在pBV-220載體的錶達佔菌體總蛋白的9.5%,基因改造後SCF佔菌體總蛋白的27%,錶達的蛋白能夠為SCF的單剋隆抗體所識彆,初步純化的sCF蛋白純度大于80%,能夠促進Mo7e細胞的增殖活性.結論密碼子偏性是影響SCF在原覈細菌中高效錶達的主要因素,通過改變密碼子偏性能過實現高效錶達.
목적분석SD서렬장도、기인기시마ATG화종지마TAA상하유처RNA적이급결구급밀마자편성등영향표체효솔적주요인소,이기실현중조인간세포인자재원핵세균중고효표체.방법분석병수개편마인SCF안기산적밀마자,분단합성개조후적기인,PCR일차성완성병접,장기인극륭도pBV-220재체상,유도표체.결과천연인SCF기인재pBV-220재체적표체점균체총단백적9.5%,기인개조후SCF점균체총단백적27%,표체적단백능구위SCF적단극륭항체소식별,초보순화적sCF단백순도대우80%,능구촉진Mo7e세포적증식활성.결론밀마자편성시영향SCF재원핵세균중고효표체적주요인소,통과개변밀마자편성능과실현고효표체.
