CAJ | 학술논문

目的:研究利用体外培养的激活脐血造血干细胞(activat ed cord blood stem cell, ACBSC),对急性淋巴细胞性白血病(ALL)患儿微小残留病(MRD) 进行免疫治疗的疗效.方法:无菌枸橼酸(ACD)抗凝脐血收集,经Percoll单个核细胞分离与植物血凝素(PHA)培养,采用桥联免疫组化(APAAP)方法进行PHA激活前后CD3、CD4、CD8抗原测定 ;应用双抗体夹心ELISA法进行肿瘤坏死因子(TNF-α)检测;利用PCR方法对克隆性重排的T 细胞受体(TCR)基因进行测定,检查外周血中ALL MRD.结果:①脐血单个核细胞以一定浓度PHA(20 mg/L)培养激活后,其中表达C D3、CD4、CD8抗原的淋巴细胞数增高.②未经PHA激活的单个核细胞TNF-α分泌呈一过性, 72 h后检测＜10 pg/ml;经PHA激活48 h后,分泌维持在一个较高水平,达600 pg/ml.③6 例ALL患儿输注前骨髓和外周血中MRD测定全部阳性,4例经多次输注,半年后MRD检测为阴性,骨髓中MRD明显减少,其余2例骨髓和外周血中MRD检测均为阴性.结论:ACBSC能够分泌抗肿瘤细胞因子及可能具有细胞毒T淋巴细胞(CTL)样作用 ;可望通过利用脐血免疫治疗方法,对小儿ALL的MRD进行彻底清除;利用ACBSC移植 ,可能是治疗小儿ALL MRD安全有效的免疫治疗方法.
목적:연구이용체외배양적격활제혈조혈간세포(activat ed cord blood stem cell, ACBSC),대급성림파세포성백혈병(ALL)환인미소잔류병(MRD) 진행면역치료적료효.방법:무균구연산(ACD)항응제혈수집,경Percoll단개핵세포분리여식물혈응소(PHA)배양,채용교련면역조화(APAAP)방법진행PHA격활전후CD3、CD4、CD8항원측정 ;응용쌍항체협심ELISA법진행종류배사인자(TNF-α)검측;이용PCR방법대극륭성중배적T 세포수체(TCR)기인진행측정,검사외주혈중ALL MRD.결과:①제혈단개핵세포이일정농도PHA(20 mg/L)배양격활후,기중표체C D3、CD4、CD8항원적림파세포수증고.②미경PHA격활적단개핵세포TNF-α분비정일과성, 72 h후검측＜10 pg/ml;경PHA격활48 h후,분비유지재일개교고수평,체600 pg/ml.③6 례ALL환인수주전골수화외주혈중MRD측정전부양성,4례경다차수주,반년후MRD검측위음성,골수중MRD명현감소,기여2례골수화외주혈중MRD검측균위음성.결론:ACBSC능구분비항종류세포인자급가능구유세포독T림파세포(CTL)양작용 ;가망통과이용제혈면역치료방법,대소인ALL적MRD진행철저청제;이용ACBSC이식 ,가능시치료소인ALL MRD안전유효적면역치료방법.