农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2005年
3期
294-298
,共5页
杨克强%王跃进%张今今%王西平%万怡震%张剑侠
楊剋彊%王躍進%張今今%王西平%萬怡震%張劍俠
양극강%왕약진%장금금%왕서평%만이진%장검협
葡萄%无核基因%限制性酶切分析%Southern杂交
葡萄%無覈基因%限製性酶切分析%Southern雜交
포도%무핵기인%한제성매절분석%Southern잡교
对葡萄(Vitis vinifera)无核基因特异标记39970524-5-564和39970524-6-1538的DNA序列进行了克隆和测序,其序列全长分别为564和1 538 bp,GenBank登录号为AY327513和AY327514.用Wingene231 DNA分析软件对39970524-5-564和39970524-6-1538序列的限制性内切酶酶切位点进行了分析,可识别6个碱基及其以上序列的酶切位点分别有30和131个;EcoRⅠ和HindⅢ在39970524-5-564特异标记上没有酶切位点,而EcoRⅠ在39970524-6-1538第135个碱基处有一个酶切位点,HindⅢ在39970524-6-1538上没有酶切位点.用39970524-5-564 DNA作探针对葡萄基因组DNA作Southem杂交,结果在无核亲本红光无核及无核基因供给者无核白和无核杂种上出现杂交带,而且呈单拷贝,而在有核亲本红地球及有核杂种上未出现杂交带,进一步证明了39970524-5-564特异片段来源于无核葡萄基因组,为检测和克隆葡萄无核基因提供了证据.
對葡萄(Vitis vinifera)無覈基因特異標記39970524-5-564和39970524-6-1538的DNA序列進行瞭剋隆和測序,其序列全長分彆為564和1 538 bp,GenBank登錄號為AY327513和AY327514.用Wingene231 DNA分析軟件對39970524-5-564和39970524-6-1538序列的限製性內切酶酶切位點進行瞭分析,可識彆6箇堿基及其以上序列的酶切位點分彆有30和131箇;EcoRⅠ和HindⅢ在39970524-5-564特異標記上沒有酶切位點,而EcoRⅠ在39970524-6-1538第135箇堿基處有一箇酶切位點,HindⅢ在39970524-6-1538上沒有酶切位點.用39970524-5-564 DNA作探針對葡萄基因組DNA作Southem雜交,結果在無覈親本紅光無覈及無覈基因供給者無覈白和無覈雜種上齣現雜交帶,而且呈單拷貝,而在有覈親本紅地毬及有覈雜種上未齣現雜交帶,進一步證明瞭39970524-5-564特異片段來源于無覈葡萄基因組,為檢測和剋隆葡萄無覈基因提供瞭證據.
대포도(Vitis vinifera)무핵기인특이표기39970524-5-564화39970524-6-1538적DNA서렬진행료극륭화측서,기서렬전장분별위564화1 538 bp,GenBank등록호위AY327513화AY327514.용Wingene231 DNA분석연건대39970524-5-564화39970524-6-1538서렬적한제성내절매매절위점진행료분석,가식별6개감기급기이상서렬적매절위점분별유30화131개;EcoRⅠ화HindⅢ재39970524-5-564특이표기상몰유매절위점,이EcoRⅠ재39970524-6-1538제135개감기처유일개매절위점,HindⅢ재39970524-6-1538상몰유매절위점.용39970524-5-564 DNA작탐침대포도기인조DNA작Southem잡교,결과재무핵친본홍광무핵급무핵기인공급자무핵백화무핵잡충상출현잡교대,이차정단고패,이재유핵친본홍지구급유핵잡충상미출현잡교대,진일보증명료39970524-5-564특이편단래원우무핵포도기인조,위검측화극륭포도무핵기인제공료증거.
