现代检验医学杂志
現代檢驗醫學雜誌
현대검험의학잡지
JOURNAL OF MODERN LABORATORY MEDICINE
2005年
5期
33-35
,共3页
二氧化硅吸附法%煮沸裂解法%核酸模板%HBV-DNA定量对比分析
二氧化硅吸附法%煮沸裂解法%覈痠模闆%HBV-DNA定量對比分析
이양화규흡부법%자비렬해법%핵산모판%HBV-DNA정량대비분석
目的比较二氧化硅吸附法与简易常用的煮沸裂解法提取样本核酸的差异,选择可靠的检测HBV-DNA提取方法.方法运用推荐的二氧化硅吸附法与简易常用的煮沸裂解法分别提取血清样本核酸模板,应用实时荧光定量PCR(FQ-PCR)检测HBV-DNA.结果共80例HBsAg阳性患者血清,二氧化硅吸附法检测其中有55例HBV-DNA阳性(＞1000拷贝/ml定性为阳性),煮沸裂解法检测出41例阳性(均在上述55例中);两法都没有检测到25例(＜1000拷贝/ml).比较41例两法都检测出的HBV-DNA定量(拷贝数/ml)对数换算值,二氧化硅吸附法(-x±s)为7.124±1.282,煮沸裂解法为5.198±1.311.统计分析表明,两种方法定性检出率差异明显:阳性符合率100%,阴性符合率64.1%,x2=12.07、P＜0.005;定量检测值也具显著性差异,相关分析Y=0.947 7X+2.200 6,r=0.969 1,P＜0.005;另外,对比10次重复提取核酸后HBV-DNA检测,二氧化硅吸附法的重复性(以CV计)4.24%明显优于煮沸裂解法11.4%.结论煮沸裂解法提取核酸模板虽然操作简单,但重复性、阳性检出率与检测值均较二氧化硅吸附法低,直接影响临床对HBV感染的诊断、冶疗以及疗效判断.建议弃用煮沸裂解法用以检测HBV-DNA.
目的比較二氧化硅吸附法與簡易常用的煮沸裂解法提取樣本覈痠的差異,選擇可靠的檢測HBV-DNA提取方法.方法運用推薦的二氧化硅吸附法與簡易常用的煮沸裂解法分彆提取血清樣本覈痠模闆,應用實時熒光定量PCR(FQ-PCR)檢測HBV-DNA.結果共80例HBsAg暘性患者血清,二氧化硅吸附法檢測其中有55例HBV-DNA暘性(＞1000拷貝/ml定性為暘性),煮沸裂解法檢測齣41例暘性(均在上述55例中);兩法都沒有檢測到25例(＜1000拷貝/ml).比較41例兩法都檢測齣的HBV-DNA定量(拷貝數/ml)對數換算值,二氧化硅吸附法(-x±s)為7.124±1.282,煮沸裂解法為5.198±1.311.統計分析錶明,兩種方法定性檢齣率差異明顯:暘性符閤率100%,陰性符閤率64.1%,x2=12.07、P＜0.005;定量檢測值也具顯著性差異,相關分析Y=0.947 7X+2.200 6,r=0.969 1,P＜0.005;另外,對比10次重複提取覈痠後HBV-DNA檢測,二氧化硅吸附法的重複性(以CV計)4.24%明顯優于煮沸裂解法11.4%.結論煮沸裂解法提取覈痠模闆雖然操作簡單,但重複性、暘性檢齣率與檢測值均較二氧化硅吸附法低,直接影響臨床對HBV感染的診斷、冶療以及療效判斷.建議棄用煮沸裂解法用以檢測HBV-DNA.
목적비교이양화규흡부법여간역상용적자비렬해법제취양본핵산적차이,선택가고적검측HBV-DNA제취방법.방법운용추천적이양화규흡부법여간역상용적자비렬해법분별제취혈청양본핵산모판,응용실시형광정량PCR(FQ-PCR)검측HBV-DNA.결과공80례HBsAg양성환자혈청,이양화규흡부법검측기중유55례HBV-DNA양성(＞1000고패/ml정성위양성),자비렬해법검측출41례양성(균재상술55례중);량법도몰유검측도25례(＜1000고패/ml).비교41례량법도검측출적HBV-DNA정량(고패수/ml)대수환산치,이양화규흡부법(-x±s)위7.124±1.282,자비렬해법위5.198±1.311.통계분석표명,량충방법정성검출솔차이명현:양성부합솔100%,음성부합솔64.1%,x2=12.07、P＜0.005;정량검측치야구현저성차이,상관분석Y=0.947 7X+2.200 6,r=0.969 1,P＜0.005;령외,대비10차중복제취핵산후HBV-DNA검측,이양화규흡부법적중복성(이CV계)4.24%명현우우자비렬해법11.4%.결론자비렬해법제취핵산모판수연조작간단,단중복성、양성검출솔여검측치균교이양화규흡부법저,직접영향림상대HBV감염적진단、야료이급료효판단.건의기용자비렬해법용이검측HBV-DNA.
