CAJ | 학술논문

目的利用一种新型的反向点杂交膜片,快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变.方法根据结核分枝杆菌rpoB基因序列设计寡核苷酸探针并固定于尼龙膜上,用生物素标记的引物增扩结核分枝杆菌rpoB基因片断,与膜片上探针杂交,膜片检测结果与常规药敏试验结果和测序结果进行对照.结果对63株临床分离株进行检测,10株利福平敏感株未检测到突变,53株耐利福平株,其中48株检测到突变.灵敏度为90.6%,特异度为100%,阳性预测值100%,阴性预测值66.7%.用反向点杂交膜片检测27份肺结核患者的痰标本,17份非结核的痰液标本.12份耐利福平的痰标本中,11份检测到突变,膜片检测与药敏结果的符合率为92.3%;15份利福平敏感的痰标本中,膜片检测结果有6份出现突变信号;17份非结核病的其他患者的痰液标本中有1份检测到突变.检测痰标本的灵敏度为91.7%,特异度为78.1%,阳性预测值61.1%,阴性预测值96.1%.结论反向点杂交膜片可简便、快速、较准确地检测出大多数结核分枝杆菌耐利福平分离株的rpoB基因突变.
목적이용일충신형적반향점잡교막편,쾌속검측결핵분지간균내리복평rpoB기인돌변.방법근거결핵분지간균rpoB기인서렬설계과핵감산탐침병고정우니룡막상,용생물소표기적인물증확결핵분지간균rpoB기인편단,여막편상탐침잡교,막편검측결과여상규약민시험결과화측서결과진행대조.결과대63주림상분리주진행검측,10주리복평민감주미검측도돌변,53주내리복평주,기중48주검측도돌변.령민도위90.6%,특이도위100%,양성예측치100%,음성예측치66.7%.용반향점잡교막편검측27빈폐결핵환자적담표본,17빈비결핵적담액표본.12빈내리복평적담표본중,11빈검측도돌변,막편검측여약민결과적부합솔위92.3%;15빈리복평민감적담표본중,막편검측결과유6빈출현돌변신호;17빈비결핵병적기타환자적담액표본중유1빈검측도돌변.검측담표본적령민도위91.7%,특이도위78.1%,양성예측치61.1%,음성예측치96.1%.결론반향점잡교막편가간편、쾌속、교준학지검측출대다수결핵분지간균내리복평분리주적rpoB기인돌변.