CAJ | 학술논문

目的:探讨血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老及凋亡相关基因Bcl-2、 Bax的表达.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,采用四甲基偶氮唑蓝比色法测定内皮细胞存活率,用Ang Ⅱ (10-6mol/L)及valsartan (Ang Ⅱ 1型受体特异性拮抗剂)干预,分为实验对照组、Ang Ⅱ诱导组及valsartan组,采用β-半乳糖苷酶染色和流式细胞术鉴定细胞衰老,通过Hoechst 33258荧光染色观察细胞形态学变化,并利用免疫细胞化学染色法、RT-PCR法和Western blotting分析各组细胞凋亡相关基因Bcl-2、 Bax mRNA及蛋白的表达水平.结果:与对照组相比,10-6mol/L Ang Ⅱ诱导组存活的细胞数为对照组的(81.90±0.04)%;(80.10±6.81)%的细胞呈现β-半乳糖苷酶阳性染色.流式细胞仪检测细胞周期停滞于G0-G1[(91.36±6.45)%],证实细胞衰老;荧光显微镜可见明显的细胞凋亡[(31.84±2.86)%].与Ang Ⅱ诱导组相比,valsartan组Bcl-2mRNA及蛋白表达水平明显增高(P<0.05), Bax mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05).结论:Ang Ⅱ可诱导体外培养的HUVECs老化.经Ang Ⅱ诱导的衰老HUVECs发生凋亡,提示细胞凋亡参与了Ang Ⅱ诱导HUVECs细胞的衰老过程.Ang Ⅱ诱导血管内皮细胞衰老的分子机制之一可能与Bcl-2、 Bax mRNA及蛋白表达的失衡有关.缬沙坦对血管内皮细胞衰老有一定保护作用.
목적:탐토혈관긴장소Ⅱ(Ang Ⅱ)유도인제정맥내피세포(HUVECs)쇠로급조망상관기인Bcl-2、 Bax적표체.방법:체외배양인제정맥내피세포,채용사갑기우담서람비색법측정내피세포존활솔,용Ang Ⅱ (10-6mol/L)급valsartan (Ang Ⅱ 1형수체특이성길항제)간예,분위실험대조조、Ang Ⅱ유도조급valsartan조,채용β-반유당감매염색화류식세포술감정세포쇠로,통과Hoechst 33258형광염색관찰세포형태학변화,병이용면역세포화학염색법、RT-PCR법화Western blotting분석각조세포조망상관기인Bcl-2、 Bax mRNA급단백적표체수평.결과:여대조조상비,10-6mol/L Ang Ⅱ유도조존활적세포수위대조조적(81.90±0.04)%;(80.10±6.81)%적세포정현β-반유당감매양성염색.류식세포의검측세포주기정체우G0-G1[(91.36±6.45)%],증실세포쇠로;형광현미경가견명현적세포조망[(31.84±2.86)%].여Ang Ⅱ유도조상비,valsartan조Bcl-2mRNA급단백표체수평명현증고(P<0.05), Bax mRNA급단백표체수평강저(P<0.05).결론:Ang Ⅱ가유도체외배양적HUVECs노화.경Ang Ⅱ유도적쇠로HUVECs발생조망,제시세포조망삼여료Ang Ⅱ유도HUVECs세포적쇠로과정.Ang Ⅱ유도혈관내피세포쇠로적분자궤제지일가능여Bcl-2、 Bax mRNA급단백표체적실형유관.힐사탄대혈관내피세포쇠로유일정보호작용.