中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2002年
3期
337-341
,共5页
王新%陈海旭%陆坚峰%张毅%屈贤铭%杨胜利
王新%陳海旭%陸堅峰%張毅%屈賢銘%楊勝利
왕신%진해욱%륙견봉%장의%굴현명%양성리
重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a(rETIa),大肠杆菌BL21(DE3),高效表达,纯化
重組刺桐胰蛋白酶抑製劑a(rETIa),大腸桿菌BL21(DE3),高效錶達,純化
중조자동이단백매억제제a(rETIa),대장간균BL21(DE3),고효표체,순화
为了大量制备重组刺桐胰蛋白酶抑制剂a(rETIa),对构建的基因工程菌株E.COLI Bl21(DE3)pET22b-mETla进行了表达条件的优化.用摇瓶培养,rETIa蛋白占菌体总蛋白40%以上.经破碎菌体-洗涤包涵体-溶解包涵体-复性初步纯化后,再经二步柱层析纯化获得电泳纯的rETIa蛋白.测定了rETIa对胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、组织型纤溶酶原激活因子缺失突变体(NTA)的抑制活性.
為瞭大量製備重組刺桐胰蛋白酶抑製劑a(rETIa),對構建的基因工程菌株E.COLI Bl21(DE3)pET22b-mETla進行瞭錶達條件的優化.用搖瓶培養,rETIa蛋白佔菌體總蛋白40%以上.經破碎菌體-洗滌包涵體-溶解包涵體-複性初步純化後,再經二步柱層析純化穫得電泳純的rETIa蛋白.測定瞭rETIa對胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、組織型纖溶酶原激活因子缺失突變體(NTA)的抑製活性.
위료대량제비중조자동이단백매억제제a(rETIa),대구건적기인공정균주E.COLI Bl21(DE3)pET22b-mETla진행료표체조건적우화.용요병배양,rETIa단백점균체총단백40%이상.경파쇄균체-세조포함체-용해포함체-복성초보순화후,재경이보주층석순화획득전영순적rETIa단백.측정료rETIa대이단백매、이응유단백매、조직형섬용매원격활인자결실돌변체(NTA)적억제활성.
