解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2010年
3期
362-366
,共5页
三七总皂苷%神经干细胞%细胞培养%四甲基偶氮唑盐比色法%免疫荧光%大鼠
三七總皂苷%神經榦細胞%細胞培養%四甲基偶氮唑鹽比色法%免疫熒光%大鼠
삼칠총조감%신경간세포%세포배양%사갑기우담서염비색법%면역형광%대서
目的 探讨不同剂量三七总皂苷( PNS)对体外培养的新生大鼠海马神经干细胞(NSCs)增殖和分化的影响.方法 无血清原代培养新生SD大鼠海马NSCs,利用巢蛋白(Nestin), 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU) 和神经元、星形胶质细胞的特异性标记物β-Ⅲ型微管蛋白(Tuj-1)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP) 对培养的NSCs 进行鉴定.将培养的细胞分为对照组、PBS组和PNS组,PNS组包括0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 g/L组,观察各组细胞克隆形成率、细胞增殖曲线和细胞分化比例.将培养的细胞分为对照组和0.4 g/L PNS组,利用流式细胞仪检测PNS对海马神经干细胞分化的影响.结果 海马神经干细胞呈神经球聚集生长,BrdU 染色阳性.加入血清后神经球周围有细胞呈放射状向四周生长,并带有突起.染色呈Tuj-1和GFAP阳性.与对照组相比,中低剂量组(0.1、0.2、0.4 g/L)对大鼠海马NSCs增殖能力无显著影响,而高剂量的三七总皂苷(0.8 g/L及1.0 g/L)干预组则明显抑制了NSCs的增殖,差异有统计学意义(P < 0. 05).在分化条件下,三七总皂苷0.4 g/L干预组显著提高NSCs向神经元分化的比例,差异有统计学意义( P < 0.05).结论三七总皂苷能够调节体外培养的大鼠海马 NSCs的增殖和分化水平,在合适的剂量下明显提高了神经元的分化比例.
目的 探討不同劑量三七總皂苷( PNS)對體外培養的新生大鼠海馬神經榦細胞(NSCs)增殖和分化的影響.方法 無血清原代培養新生SD大鼠海馬NSCs,利用巢蛋白(Nestin), 5-溴脫氧尿嘧啶覈苷(BrdU) 和神經元、星形膠質細胞的特異性標記物β-Ⅲ型微管蛋白(Tuj-1)和膠質纖維痠性蛋白(GFAP) 對培養的NSCs 進行鑒定.將培養的細胞分為對照組、PBS組和PNS組,PNS組包括0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 g/L組,觀察各組細胞剋隆形成率、細胞增殖麯線和細胞分化比例.將培養的細胞分為對照組和0.4 g/L PNS組,利用流式細胞儀檢測PNS對海馬神經榦細胞分化的影響.結果 海馬神經榦細胞呈神經毬聚集生長,BrdU 染色暘性.加入血清後神經毬週圍有細胞呈放射狀嚮四週生長,併帶有突起.染色呈Tuj-1和GFAP暘性.與對照組相比,中低劑量組(0.1、0.2、0.4 g/L)對大鼠海馬NSCs增殖能力無顯著影響,而高劑量的三七總皂苷(0.8 g/L及1.0 g/L)榦預組則明顯抑製瞭NSCs的增殖,差異有統計學意義(P < 0. 05).在分化條件下,三七總皂苷0.4 g/L榦預組顯著提高NSCs嚮神經元分化的比例,差異有統計學意義( P < 0.05).結論三七總皂苷能夠調節體外培養的大鼠海馬 NSCs的增殖和分化水平,在閤適的劑量下明顯提高瞭神經元的分化比例.
목적 탐토불동제량삼칠총조감( PNS)대체외배양적신생대서해마신경간세포(NSCs)증식화분화적영향.방법 무혈청원대배양신생SD대서해마NSCs,이용소단백(Nestin), 5-추탈양뇨밀정핵감(BrdU) 화신경원、성형효질세포적특이성표기물β-Ⅲ형미관단백(Tuj-1)화효질섬유산성단백(GFAP) 대배양적NSCs 진행감정.장배양적세포분위대조조、PBS조화PNS조,PNS조포괄0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 g/L조,관찰각조세포극륭형성솔、세포증식곡선화세포분화비례.장배양적세포분위대조조화0.4 g/L PNS조,이용류식세포의검측PNS대해마신경간세포분화적영향.결과 해마신경간세포정신경구취집생장,BrdU 염색양성.가입혈청후신경구주위유세포정방사상향사주생장,병대유돌기.염색정Tuj-1화GFAP양성.여대조조상비,중저제량조(0.1、0.2、0.4 g/L)대대서해마NSCs증식능력무현저영향,이고제량적삼칠총조감(0.8 g/L급1.0 g/L)간예조칙명현억제료NSCs적증식,차이유통계학의의(P < 0. 05).재분화조건하,삼칠총조감0.4 g/L간예조현저제고NSCs향신경원분화적비례,차이유통계학의의( P < 0.05).결론삼칠총조감능구조절체외배양적대서해마 NSCs적증식화분화수평,재합괄적제량하명현제고료신경원적분화비례.
