畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2012年
4期
53-55
,共3页
高建伟%鲁承%贾文影%许应天%宋建臣%杜秋明
高建偉%魯承%賈文影%許應天%宋建臣%杜鞦明
고건위%로승%가문영%허응천%송건신%두추명
新孢子虫%核糖体磷蛋白P0%DNA疫苗%沙鼠%免疫应答
新孢子蟲%覈糖體燐蛋白P0%DNA疫苗%沙鼠%免疫應答
신포자충%핵당체린단백P0%DNA역묘%사서%면역응답
为了筛选得到免疫效果较理想的核酸疫苗,采用pVAXⅠ为真核表达载体,新孢子虫P0基因为目的基因,构建了重组质粒pVAXⅠ -NcP0.用重组质粒免疫成年沙鼠60只,剂量为100 μg/只,每隔14 d免疫1次,共免3次,首免后每周尾静脉采血1次,三免后第2周,每组处死7只沙鼠,无菌取脾.采用间接荧光抗体试验检测沙鼠血清抗体效价,流式细胞仪检测脾T淋巴细胞亚群CD4+、CD8+数量.结果:Cp-M佐剂组、pVAX Ⅰ -NcP0组的抗体效价均高于pVAXⅠ 空载体组和对照组,其中Cp-M组效价最高；脾T淋巴细胞亚群数量测定发现,疫苗Cp-M佐剂组、pVAXⅠ -NcP0组的CD4+细胞含量均高于pVAXⅠ空载体组和对照组,Cp-M组、pVAXⅠ -NcP0组与pVAXⅠ空载体组和对照组均差异极显著(P＜0.01),Cp-M组、pVAXⅠ -NcP0组的CD8+细胞含量均高于pVAX Ⅰ空载体组和对照组,Cp-M佐剂组与pVAXⅠ空载体组和对照组差异显著(P＜0.05).表明DNA疫苗pVAXⅠ -NcP0既能较好地刺激细胞免疫又能产生一定的体液免疫反应,可作为候选核酸疫苗进行下一步本体动物免疫试验研究.
為瞭篩選得到免疫效果較理想的覈痠疫苗,採用pVAXⅠ為真覈錶達載體,新孢子蟲P0基因為目的基因,構建瞭重組質粒pVAXⅠ -NcP0.用重組質粒免疫成年沙鼠60隻,劑量為100 μg/隻,每隔14 d免疫1次,共免3次,首免後每週尾靜脈採血1次,三免後第2週,每組處死7隻沙鼠,無菌取脾.採用間接熒光抗體試驗檢測沙鼠血清抗體效價,流式細胞儀檢測脾T淋巴細胞亞群CD4+、CD8+數量.結果:Cp-M佐劑組、pVAX Ⅰ -NcP0組的抗體效價均高于pVAXⅠ 空載體組和對照組,其中Cp-M組效價最高；脾T淋巴細胞亞群數量測定髮現,疫苗Cp-M佐劑組、pVAXⅠ -NcP0組的CD4+細胞含量均高于pVAXⅠ空載體組和對照組,Cp-M組、pVAXⅠ -NcP0組與pVAXⅠ空載體組和對照組均差異極顯著(P＜0.01),Cp-M組、pVAXⅠ -NcP0組的CD8+細胞含量均高于pVAX Ⅰ空載體組和對照組,Cp-M佐劑組與pVAXⅠ空載體組和對照組差異顯著(P＜0.05).錶明DNA疫苗pVAXⅠ -NcP0既能較好地刺激細胞免疫又能產生一定的體液免疫反應,可作為候選覈痠疫苗進行下一步本體動物免疫試驗研究.
위료사선득도면역효과교이상적핵산역묘,채용pVAXⅠ위진핵표체재체,신포자충P0기인위목적기인,구건료중조질립pVAXⅠ -NcP0.용중조질립면역성년사서60지,제량위100 μg/지,매격14 d면역1차,공면3차,수면후매주미정맥채혈1차,삼면후제2주,매조처사7지사서,무균취비.채용간접형광항체시험검측사서혈청항체효개,류식세포의검측비T림파세포아군CD4+、CD8+수량.결과:Cp-M좌제조、pVAX Ⅰ -NcP0조적항체효개균고우pVAXⅠ 공재체조화대조조,기중Cp-M조효개최고；비T림파세포아군수량측정발현,역묘Cp-M좌제조、pVAXⅠ -NcP0조적CD4+세포함량균고우pVAXⅠ공재체조화대조조,Cp-M조、pVAXⅠ -NcP0조여pVAXⅠ공재체조화대조조균차이겁현저(P＜0.01),Cp-M조、pVAXⅠ -NcP0조적CD8+세포함량균고우pVAX Ⅰ공재체조화대조조,Cp-M좌제조여pVAXⅠ공재체조화대조조차이현저(P＜0.05).표명DNA역묘pVAXⅠ -NcP0기능교호지자격세포면역우능산생일정적체액면역반응,가작위후선핵산역묘진행하일보본체동물면역시험연구.
