华南农业大学学报(自然科学版)
華南農業大學學報(自然科學版)
화남농업대학학보(자연과학판)
JOURNAL OF SOUTH CHINA AGRICULTURAL UNIVERSITY
2004年
4期
53-57
,共5页
陈远玲%张群宇%简玉瑜%杨跃生%刘耀光
陳遠玲%張群宇%簡玉瑜%楊躍生%劉耀光
진원령%장군우%간옥유%양약생%류요광
水稻%突变体库%反义基因沉默%突变体筛选
水稻%突變體庫%反義基因沉默%突變體篩選
수도%돌변체고%반의기인침묵%돌변체사선
尝试利用鸟枪反义基因沉默策略构建水稻突变体库. 利用水稻反义cDNA文库转化粳稻品种中花11,获得了来源于105块潮霉素(Hm)抗性愈伤组织的1 486个转化植株. 随机选择来源于11个独立转化系的335个T0植株进行Hm离体叶片筛选,结果表明所有植株均呈抗性,并且与PCR检测结果相吻合,说明T0植株中不存在假转化体. Southern blot 分析结果表明T0植株大部分为单位点整合. T0及T1代转化植株均呈现了一些形态变异,如矮化、无分蘖或多分蘖、结实率降低、粒型或穗型改变、小穗结构改变等. 利用Hm离体叶片筛选法对部分T1群体进行筛选,得到了1个变异性状与Hm抗性共分离的突变体,该突变体的变异表型为结实率比非转化对照下降约50%,每穗颖花总数比对照减少约40%,二者的总效应导致突变体单穗产量比对照约下降70%.
嘗試利用鳥鎗反義基因沉默策略構建水稻突變體庫. 利用水稻反義cDNA文庫轉化粳稻品種中花11,穫得瞭來源于105塊潮黴素(Hm)抗性愈傷組織的1 486箇轉化植株. 隨機選擇來源于11箇獨立轉化繫的335箇T0植株進行Hm離體葉片篩選,結果錶明所有植株均呈抗性,併且與PCR檢測結果相吻閤,說明T0植株中不存在假轉化體. Southern blot 分析結果錶明T0植株大部分為單位點整閤. T0及T1代轉化植株均呈現瞭一些形態變異,如矮化、無分蘗或多分蘗、結實率降低、粒型或穗型改變、小穗結構改變等. 利用Hm離體葉片篩選法對部分T1群體進行篩選,得到瞭1箇變異性狀與Hm抗性共分離的突變體,該突變體的變異錶型為結實率比非轉化對照下降約50%,每穗穎花總數比對照減少約40%,二者的總效應導緻突變體單穗產量比對照約下降70%.
상시이용조창반의기인침묵책략구건수도돌변체고. 이용수도반의cDNA문고전화갱도품충중화11,획득료래원우105괴조매소(Hm)항성유상조직적1 486개전화식주. 수궤선택래원우11개독립전화계적335개T0식주진행Hm리체협편사선,결과표명소유식주균정항성,병차여PCR검측결과상문합,설명T0식주중불존재가전화체. Southern blot 분석결과표명T0식주대부분위단위점정합. T0급T1대전화식주균정현료일사형태변이,여왜화、무분얼혹다분얼、결실솔강저、립형혹수형개변、소수결구개변등. 이용Hm리체협편사선법대부분T1군체진행사선,득도료1개변이성상여Hm항성공분리적돌변체,해돌변체적변이표형위결실솔비비전화대조하강약50%,매수영화총수비대조감소약40%,이자적총효응도치돌변체단수산량비대조약하강70%.