病毒学报
病毒學報
병독학보
CHINESE JOURNAL OF VIROLOGY
2005年
1期
43-47
,共5页
王毅%吴海祥%张楚瑜%伊光辉%曹晟%温国元
王毅%吳海祥%張楚瑜%伊光輝%曹晟%溫國元
왕의%오해상%장초유%이광휘%조성%온국원
猪瘟病毒%全长cDNA克隆%体外转录%电镜观测%动物实验
豬瘟病毒%全長cDNA剋隆%體外轉錄%電鏡觀測%動物實驗
저온병독%전장cDNA극륭%체외전록%전경관측%동물실험
为了建立研究猪瘟病毒的技术平台,利用RT-PCR技术构建了猪瘟病毒中国石门株(Shimen)的全长有感染性cDNA克隆pT7SM.通过体外转录线性化的pT7SM并将转录的RNA转染至PK-15细胞中,获得了猪瘟病毒粒子.再用间接免疫荧光法测定了其生长曲线,通过电镜观察到重组病毒呈球形,具有囊膜结构.进一步把获得的猪瘟病毒粒子感染非免疫实验猪,结果子代病毒与石门株类似,对非免疫实验猪有强烈的致病性,证明该全长cDNA克隆可靠稳定,忠实地保留了石门株病毒的感染性和致病特征.由此为进一步探讨猪瘟病毒的致弱机制及病毒与机体相互作用的机制打下了良好的基础.
為瞭建立研究豬瘟病毒的技術平檯,利用RT-PCR技術構建瞭豬瘟病毒中國石門株(Shimen)的全長有感染性cDNA剋隆pT7SM.通過體外轉錄線性化的pT7SM併將轉錄的RNA轉染至PK-15細胞中,穫得瞭豬瘟病毒粒子.再用間接免疫熒光法測定瞭其生長麯線,通過電鏡觀察到重組病毒呈毬形,具有囊膜結構.進一步把穫得的豬瘟病毒粒子感染非免疫實驗豬,結果子代病毒與石門株類似,對非免疫實驗豬有彊烈的緻病性,證明該全長cDNA剋隆可靠穩定,忠實地保留瞭石門株病毒的感染性和緻病特徵.由此為進一步探討豬瘟病毒的緻弱機製及病毒與機體相互作用的機製打下瞭良好的基礎.
위료건립연구저온병독적기술평태,이용RT-PCR기술구건료저온병독중국석문주(Shimen)적전장유감염성cDNA극륭pT7SM.통과체외전록선성화적pT7SM병장전록적RNA전염지PK-15세포중,획득료저온병독입자.재용간접면역형광법측정료기생장곡선,통과전경관찰도중조병독정구형,구유낭막결구.진일보파획득적저온병독입자감염비면역실험저,결과자대병독여석문주유사,대비면역실험저유강렬적치병성,증명해전장cDNA극륭가고은정,충실지보류료석문주병독적감염성화치병특정.유차위진일보탐토저온병독적치약궤제급병독여궤체상호작용적궤제타하료량호적기출.
