高技术通讯
高技術通訊
고기술통신
HIGH TECHNOLOGY LETTERS
2005年
2期
71-78
,共8页
杨秀红%陈庆山%杨庆凯%李文滨
楊秀紅%陳慶山%楊慶凱%李文濱
양수홍%진경산%양경개%리문빈
大豆%NBS类抗病相关基因%克隆%内含子
大豆%NBS類抗病相關基因%剋隆%內含子
대두%NBS류항병상관기인%극륭%내함자
根据拟南芥RPS2基因、烟草N基因和亚麻L6基因的保守结构域设计简并引物,采用RT-PCR方法从大豆抗疫霉根腐病品种绥农10号的RNA中扩增获得两个通读的大豆NBS类抗病基因同源片段RNEAU-1和RNEAU-2,长度均为513bp,编码171个氨基酸.以RNEAU-1为靶序列,采用RACE方法获得了全长3574bp的大豆抗病相关基因SR1,该基因包括3411bp的开放读码框,72bp的5′非翻译区(non-translated region,NTR),68bp的3′非翻译区和20bp的多聚腺苷酸尾.编码1137个通读的蛋白质氨基酸序列,基因编码产物具有TIR、NBS、LRR、HD(conserved domain 1)和conserved domain 2等一系列抗病基因的保守结构域.同源性比较和序列分析显示,该基因为大豆中TIR-NBS-LRR类抗病相关基因.Southern杂交结果表明,SR1基因(或其同源基因)在大豆中具有2～4个拷贝.RT-PCR检测表明,SR1基因在大豆中为低丰度组成型表达,其表达不受病原菌接种和水杨酸的诱导,亦无组织特异性.以绥农10号基因组DNA为模板扩增得到长度为3972bp的SR1基因转录区核苷酸序列,其结构包含5个外显子和4个内含子.SR1基因在GenBank上的登录号为AY193892.
根據擬南芥RPS2基因、煙草N基因和亞痳L6基因的保守結構域設計簡併引物,採用RT-PCR方法從大豆抗疫黴根腐病品種綏農10號的RNA中擴增穫得兩箇通讀的大豆NBS類抗病基因同源片段RNEAU-1和RNEAU-2,長度均為513bp,編碼171箇氨基痠.以RNEAU-1為靶序列,採用RACE方法穫得瞭全長3574bp的大豆抗病相關基因SR1,該基因包括3411bp的開放讀碼框,72bp的5′非翻譯區(non-translated region,NTR),68bp的3′非翻譯區和20bp的多聚腺苷痠尾.編碼1137箇通讀的蛋白質氨基痠序列,基因編碼產物具有TIR、NBS、LRR、HD(conserved domain 1)和conserved domain 2等一繫列抗病基因的保守結構域.同源性比較和序列分析顯示,該基因為大豆中TIR-NBS-LRR類抗病相關基因.Southern雜交結果錶明,SR1基因(或其同源基因)在大豆中具有2～4箇拷貝.RT-PCR檢測錶明,SR1基因在大豆中為低豐度組成型錶達,其錶達不受病原菌接種和水楊痠的誘導,亦無組織特異性.以綏農10號基因組DNA為模闆擴增得到長度為3972bp的SR1基因轉錄區覈苷痠序列,其結構包含5箇外顯子和4箇內含子.SR1基因在GenBank上的登錄號為AY193892.
근거의남개RPS2기인、연초N기인화아마L6기인적보수결구역설계간병인물,채용RT-PCR방법종대두항역매근부병품충수농10호적RNA중확증획득량개통독적대두NBS류항병기인동원편단RNEAU-1화RNEAU-2,장도균위513bp,편마171개안기산.이RNEAU-1위파서렬,채용RACE방법획득료전장3574bp적대두항병상관기인SR1,해기인포괄3411bp적개방독마광,72bp적5′비번역구(non-translated region,NTR),68bp적3′비번역구화20bp적다취선감산미.편마1137개통독적단백질안기산서렬,기인편마산물구유TIR、NBS、LRR、HD(conserved domain 1)화conserved domain 2등일계렬항병기인적보수결구역.동원성비교화서렬분석현시,해기인위대두중TIR-NBS-LRR류항병상관기인.Southern잡교결과표명,SR1기인(혹기동원기인)재대두중구유2～4개고패.RT-PCR검측표명,SR1기인재대두중위저봉도조성형표체,기표체불수병원균접충화수양산적유도,역무조직특이성.이수농10호기인조DNA위모판확증득도장도위3972bp적SR1기인전록구핵감산서렬,기결구포함5개외현자화4개내함자.SR1기인재GenBank상적등록호위AY193892.
