CAJ | 학술논문

目的探讨低氧和抗氧化剂诱导醌氧化还原酶1(NQO1)基因表达及其与细胞增殖的关系和诱导表达的调节机制.方法人肝癌细胞SMMC-7721经抗氧化剂[酪醇(p-Ty),丁基羟茴香醚(BHA),β-萘黄酮(β-NF)]、低氧或两者共同处理24 h,分别采用微孔板测定法、RT-PCR、结晶紫显色法、电泳迁移率变动试验(EMSA)测定MQO1活力,NQO1mRNA表达,细胞增殖和细胞核蛋白与抗氧化反应元件(ARE)的结合情况.结果常氧下BHA,β-NF和p-Ty均能诱导NQO1比活力增加,酪醇诱导NQO1mRNA表达呈剂量依赖性增加,且与酶比活力存在明显的相关性;酪醇在一定范围内,其抑制细胞增殖的能力呈剂量依赖性,且细胞增殖与酶比活力存在负相关.低氧与抗氧化剂共同处理比常氧下抗氧化剂诱导NQO1比活力有增加(r=-0.41,P＜0.01).EMSA试验表明,ARE能与低氧、抗氧化剂或低氧+抗氧化剂诱导的核蛋白特异结合.结论抗氧化剂在常氧下可诱导人肝癌细胞NQO1活力增加,低氧加强其诱导能力.其中酪醇诱导NQO1活力与NQO1mRNA表达量增加相关,同时酪醇能抑制细胞的增殖,这种增殖抑制与酶活力诱导增加有关.ARE参与介导抗氧化剂和低氧诱导NQO1基因表达的调节.
목적탐토저양화항양화제유도곤양화환원매1(NQO1)기인표체급기여세포증식적관계화유도표체적조절궤제.방법인간암세포SMMC-7721경항양화제[락순(p-Ty),정기간회향미(BHA),β-내황동(β-NF)]、저양혹량자공동처리24 h,분별채용미공판측정법、RT-PCR、결정자현색법、전영천이솔변동시험(EMSA)측정MQO1활력,NQO1mRNA표체,세포증식화세포핵단백여항양화반응원건(ARE)적결합정황.결과상양하BHA,β-NF화p-Ty균능유도NQO1비활력증가,락순유도NQO1mRNA표체정제량의뢰성증가,차여매비활력존재명현적상관성;락순재일정범위내,기억제세포증식적능력정제량의뢰성,차세포증식여매비활력존재부상관.저양여항양화제공동처리비상양하항양화제유도NQO1비활력유증가(r=-0.41,P＜0.01).EMSA시험표명,ARE능여저양、항양화제혹저양+항양화제유도적핵단백특이결합.결론항양화제재상양하가유도인간암세포NQO1활력증가,저양가강기유도능력.기중락순유도NQO1활력여NQO1mRNA표체량증가상관,동시락순능억제세포적증식,저충증식억제여매활력유도증가유관.ARE삼여개도항양화제화저양유도NQO1기인표체적조절.