CAJ | 학술논문

目的:报道1个在中国人遗传性非息肉病性结直肠癌(HNPCC)家系中发现的基因突变,并对其功能进行分析.方法:抽提1组符合Amsterdam标准的HNPCC家系先证者和其他家系成员的基因组DNA,PCR扩增先证者hMLH1 19个外显子和hMSH2 16个外显子,利用变性高效液相技术(dHPLC)筛查,对异常峰型利用DNA测序方法检测基因突变.发现先证者hMSH2基因存在错义突变后,对家系中其他成员和50名散发性大肠癌患者和100名正常成年人进行相同位点的检测,以判定是单核苷酸多态性位点(SNP)还是突变.利用5对微卫星标记对该家系中的2例肿瘤进行微卫星不稳定分析,免疫组化检测蛋白表达,利用同源建模方法对发现的突变位点进行功能分析,以研究突变的病理意义. 结果:在该家系的2例结肠癌患者中均发现hMSH2基因第13外显子2 108位出现C-A的错义突变,导致703位Ser变异为Tyr,即C.2 108C>A(p.Ser703Tyr),微卫星结果显示2例肿瘤均为微卫星高度不稳定(MSI-H),肿瘤免疫组化结果显示hMSH1基因表达正常而hMSH2基因不表达.同源建模发现该位点与目前报道的hMSH2基因突变不同,突变位于第Ⅳ结构域,Ser突变为Tyr后空间位阻增大,影响了蛋白的正常折叠和功能.结论:Ser703Tyr是中国人HNPCC的一个新的病理性突变.
목적:보도1개재중국인유전성비식육병성결직장암(HNPCC)가계중발현적기인돌변,병대기공능진행분석.방법:추제1조부합Amsterdam표준적HNPCC가계선증자화기타가계성원적기인조DNA,PCR확증선증자hMLH1 19개외현자화hMSH2 16개외현자,이용변성고효액상기술(dHPLC)사사,대이상봉형이용DNA측서방법검측기인돌변.발현선증자hMSH2기인존재착의돌변후,대가계중기타성원화50명산발성대장암환자화100명정상성년인진행상동위점적검측,이판정시단핵감산다태성위점(SNP)환시돌변.이용5대미위성표기대해가계중적2례종류진행미위성불은정분석,면역조화검측단백표체,이용동원건모방법대발현적돌변위점진행공능분석,이연구돌변적병리의의. 결과:재해가계적2례결장암환자중균발현hMSH2기인제13외현자2 108위출현C-A적착의돌변,도치703위Ser변이위Tyr,즉C.2 108C>A(p.Ser703Tyr),미위성결과현시2례종류균위미위성고도불은정(MSI-H),종류면역조화결과현시hMSH1기인표체정상이hMSH2기인불표체.동원건모발현해위점여목전보도적hMSH2기인돌변불동,돌변위우제Ⅳ결구역,Ser돌변위Tyr후공간위조증대,영향료단백적정상절첩화공능.결론:Ser703Tyr시중국인HNPCC적일개신적병이성돌변.