军事医学科学院院刊
軍事醫學科學院院刊
군사의학과학원원간
BULLETIN OF THE ACADEMY OF MILITARY MEDICAL SCIENCES
2006年
4期
365-368
,共4页
顾若兰%朱晓霞%孟志云%窦桂芳
顧若蘭%硃曉霞%孟誌雲%竇桂芳
고약란%주효하%맹지운%두계방
细胞分离%肝细胞%胶原酶类%代谢
細胞分離%肝細胞%膠原酶類%代謝
세포분리%간세포%효원매류%대사
目的:建立一种简便、经济、高效分离原代大鼠肝细胞的方法,适用于体外药物代谢研究.方法:改进方法采用低浓度胶原酶"软消化"方式,并增加预孵育过程.比较传统分离方法和改进方法在细胞产量、活率以及胶原酶用量上的差异,并将改进方法所得细胞分别与CYP2C、CYP2E、CYP3A典型底物及新药17-AAG共孵育,检测CYP450酶活性及其实际应用价值.结果:改进方法分离的肝细胞在细胞产量尤其是活率上明显高于传统方法,胶原酶用量大大降低,典型底物甲苯磺丁脲、氯唑沙宗和睾酮经细胞代谢检测到典型羟基化代谢产物,17-AAG经孵育后与体内样品检测结果一致.结论:改进方法可明显提高细胞产量和活率,所得肝细胞具备良好的CYP450酶活性,适用于体外代谢研究,预测药物体内过程.
目的:建立一種簡便、經濟、高效分離原代大鼠肝細胞的方法,適用于體外藥物代謝研究.方法:改進方法採用低濃度膠原酶"軟消化"方式,併增加預孵育過程.比較傳統分離方法和改進方法在細胞產量、活率以及膠原酶用量上的差異,併將改進方法所得細胞分彆與CYP2C、CYP2E、CYP3A典型底物及新藥17-AAG共孵育,檢測CYP450酶活性及其實際應用價值.結果:改進方法分離的肝細胞在細胞產量尤其是活率上明顯高于傳統方法,膠原酶用量大大降低,典型底物甲苯磺丁脲、氯唑沙宗和睪酮經細胞代謝檢測到典型羥基化代謝產物,17-AAG經孵育後與體內樣品檢測結果一緻.結論:改進方法可明顯提高細胞產量和活率,所得肝細胞具備良好的CYP450酶活性,適用于體外代謝研究,預測藥物體內過程.
목적:건립일충간편、경제、고효분리원대대서간세포적방법,괄용우체외약물대사연구.방법:개진방법채용저농도효원매"연소화"방식,병증가예부육과정.비교전통분리방법화개진방법재세포산량、활솔이급효원매용량상적차이,병장개진방법소득세포분별여CYP2C、CYP2E、CYP3A전형저물급신약17-AAG공부육,검측CYP450매활성급기실제응용개치.결과:개진방법분리적간세포재세포산량우기시활솔상명현고우전통방법,효원매용량대대강저,전형저물갑분광정뇨、록서사종화고동경세포대사검측도전형간기화대사산물,17-AAG경부육후여체내양품검측결과일치.결론:개진방법가명현제고세포산량화활솔,소득간세포구비량호적CYP450매활성,괄용우체외대사연구,예측약물체내과정.
