细胞与分子免疫学杂志
細胞與分子免疫學雜誌
세포여분자면역학잡지
2007年
7期
620-622
,共3页
杨应忠%白振中%靳国恩%马兰%韵海霞%格日力
楊應忠%白振中%靳國恩%馬蘭%韻海霞%格日力
양응충%백진중%근국은%마란%운해하%격일력
高原适应%藏羚羊%α-珠蛋白%基因克隆%同源性分析
高原適應%藏羚羊%α-珠蛋白%基因剋隆%同源性分析
고원괄응%장령양%α-주단백%기인극륭%동원성분석
目的:克隆藏羚羊α-珠蛋白基因编码区, 并进行同源性分析.方法:从藏羚羊肝组织中提取总RNA, 通过RT-PCR获得藏羚羊α-珠蛋白cDNA, 将其与pGEM-T Easy载体连接, 构成重组质粒, 并转化大肠杆菌TOP10扩增培养后, 鉴定阳性质粒并进行测序.将测序的结果与NCBI 数据库进行同源性比较.结果:获得α- 珠蛋白编码区cDNA序列, 提交GenBank数据库并取得注册号为DQ650713.与绵羊α-珠蛋白基因相比较, 其在16、53、132、134处出现核苷酸密码子突变(GAC→GGC)、(TCG→TCC)、(AGC→GGC)、(AAC→GC).推导的氨基酸序列比较发现,132位的天冬酰胺酸(Asn)突变为丝氨酸(Ser), 134位的丝氨酸(Ser)突变为甘氨酸(Gly);与人类的α-珠蛋白相比较, 有19处的氨基酸发生改变.结论:成功地克隆出藏羚羊α-珠蛋白基因编码区, 为高原低氧适应相关基因的研究提供了实验依据.
目的:剋隆藏羚羊α-珠蛋白基因編碼區, 併進行同源性分析.方法:從藏羚羊肝組織中提取總RNA, 通過RT-PCR穫得藏羚羊α-珠蛋白cDNA, 將其與pGEM-T Easy載體連接, 構成重組質粒, 併轉化大腸桿菌TOP10擴增培養後, 鑒定暘性質粒併進行測序.將測序的結果與NCBI 數據庫進行同源性比較.結果:穫得α- 珠蛋白編碼區cDNA序列, 提交GenBank數據庫併取得註冊號為DQ650713.與綿羊α-珠蛋白基因相比較, 其在16、53、132、134處齣現覈苷痠密碼子突變(GAC→GGC)、(TCG→TCC)、(AGC→GGC)、(AAC→GC).推導的氨基痠序列比較髮現,132位的天鼕酰胺痠(Asn)突變為絲氨痠(Ser), 134位的絲氨痠(Ser)突變為甘氨痠(Gly);與人類的α-珠蛋白相比較, 有19處的氨基痠髮生改變.結論:成功地剋隆齣藏羚羊α-珠蛋白基因編碼區, 為高原低氧適應相關基因的研究提供瞭實驗依據.
목적:극륭장령양α-주단백기인편마구, 병진행동원성분석.방법:종장령양간조직중제취총RNA, 통과RT-PCR획득장령양α-주단백cDNA, 장기여pGEM-T Easy재체련접, 구성중조질립, 병전화대장간균TOP10확증배양후, 감정양성질립병진행측서.장측서적결과여NCBI 수거고진행동원성비교.결과:획득α- 주단백편마구cDNA서렬, 제교GenBank수거고병취득주책호위DQ650713.여면양α-주단백기인상비교, 기재16、53、132、134처출현핵감산밀마자돌변(GAC→GGC)、(TCG→TCC)、(AGC→GGC)、(AAC→GC).추도적안기산서렬비교발현,132위적천동선알산(Asn)돌변위사안산(Ser), 134위적사안산(Ser)돌변위감안산(Gly);여인류적α-주단백상비교, 유19처적안기산발생개변.결론:성공지극륭출장령양α-주단백기인편마구, 위고원저양괄응상관기인적연구제공료실험의거.
