CAJ | 학술논문

目的:了解血小板膜糖蛋白(GP)Ⅱ b/Ⅲa对基质金属蛋白酶(MMP-2,9)mRNA表达的影响.方法:体外培养人脐静脉内皮细胞,分别用酶谱法和逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测MMP-2,-9活性和mRNA表达.待细胞融合成单层后,分别加入无血清培养基,静息期血小板,活化后血小板及白细胞介素-1β(IL-β), 共同培养60 min后,洗去血小板,内皮细胞继续培养6 h.上清液及细胞分别用于酶谱法检测MMP-2和MMP-9活性,以及RT-PCR分析mRNA表达.结果:内皮细胞与活化血小板共同培养后,酶谱法显示:与对照组相比,未活化的血小板轻微诱导MMP-2和 MMP-9分泌(P<0.05),而活化状态的血小板能显著诱导这二者的分泌(P<0.01),与IL-1β的作用相当;而且还可以见到62 kDaMMP-2活化形式.加入阻断剂GRGDSP以及GPⅡb/Ⅲa单克隆抗体 (7E3)后检测发现,MMP-2和MMP-9分泌减少.与活化血小板共同培养后的内皮细胞表面表达uPAR和MT1-MMP以及上清液中MMP-2的mRNA与对照组相比明显增高(P<0.01),而静息状态的血小板作用不显著.加入GRGDSP或7E3后,mRNA的表达降低.结论:(1)活化状态的血小板与IL-β的作用相当,能显著诱导MMP-2和MMP-9分泌;能明显增高内皮细胞uPAR和MT1-MMP及上清液中MMP-2 mRNA的表达;(2)GPⅡb/Ⅲa阻断剂可能抑制血小板在不稳定斑块部位聚集、粘附等一系列炎症反应.
목적:료해혈소판막당단백(GP)Ⅱ b/Ⅲa대기질금속단백매(MMP-2,9)mRNA표체적영향.방법:체외배양인제정맥내피세포,분별용매보법화역전록취합매련식반응(RT-PCR)검측MMP-2,-9활성화mRNA표체.대세포융합성단층후,분별가입무혈청배양기,정식기혈소판,활화후혈소판급백세포개소-1β(IL-β), 공동배양60 min후,세거혈소판,내피세포계속배양6 h.상청액급세포분별용우매보법검측MMP-2화MMP-9활성,이급RT-PCR분석mRNA표체.결과:내피세포여활화혈소판공동배양후,매보법현시:여대조조상비,미활화적혈소판경미유도MMP-2화 MMP-9분비(P<0.05),이활화상태적혈소판능현저유도저이자적분비(P<0.01),여IL-1β적작용상당;이차환가이견도62 kDaMMP-2활화형식.가입조단제GRGDSP이급GPⅡb/Ⅲa단극륭항체 (7E3)후검측발현,MMP-2화MMP-9분비감소.여활화혈소판공동배양후적내피세포표면표체uPAR화MT1-MMP이급상청액중MMP-2적mRNA여대조조상비명현증고(P<0.01),이정식상태적혈소판작용불현저.가입GRGDSP혹7E3후,mRNA적표체강저.결론:(1)활화상태적혈소판여IL-β적작용상당,능현저유도MMP-2화MMP-9분비;능명현증고내피세포uPAR화MT1-MMP급상청액중MMP-2 mRNA적표체;(2)GPⅡb/Ⅲa조단제가능억제혈소판재불은정반괴부위취집、점부등일계렬염증반응.