CAJ | 학술논문

目的:体外原核表达小鼠Foxp3蛋白,并以其免疫家兔,制备多克隆抗体.方法:从质粒Foxp3-pMD-18T扩增小鼠Foxp3 全长基因,亚克隆至原核表达载体pET-32a,转化E.coli BL-21;IPTG诱导表达目的蛋白,Ni2+-NTA柱纯化及蛋白质印迹鉴定蛋白;纯化蛋白免疫家兔,制备多克隆抗体,ELISA法检测抗体效价,蛋白质印迹检测抗体特异性.结果:成功构建了Foxp3-pET-32a原核表达载体,表达和纯化了目的蛋白;ELISA法检测抗体效价为1∶ 20 000,蛋白质印迹检测结果显示抗体特异性与小鼠Foxp3蛋白结合.结论:成功表达小鼠Foxp3蛋白并制备了多克隆抗体.
목적:체외원핵표체소서Foxp3단백,병이기면역가토,제비다극륭항체.방법:종질립Foxp3-pMD-18T확증소서Foxp3 전장기인,아극륭지원핵표체재체pET-32a,전화E.coli BL-21;IPTG유도표체목적단백,Ni2+-NTA주순화급단백질인적감정단백;순화단백면역가토,제비다극륭항체,ELISA법검측항체효개,단백질인적검측항체특이성.결과:성공구건료Foxp3-pET-32a원핵표체재체,표체화순화료목적단백;ELISA법검측항체효개위1∶ 20 000,단백질인적검측결과현시항체특이성여소서Foxp3단백결합.결론:성공표체소서Foxp3단백병제비료다극륭항체.