中国组织工程研究与临床康复
中國組織工程研究與臨床康複
중국조직공정연구여림상강복
JOURNAL OF CLINICAL REHABILITATIVE TISSUE ENGINEERING RESEARCH
2009年
29期
5669-5672
,共4页
刘东京%张阳德%吴季霖%刘美洲%刘东非%潘一峰%陈伟%刘辉%曾庆仁
劉東京%張暘德%吳季霖%劉美洲%劉東非%潘一峰%陳偉%劉輝%曾慶仁
류동경%장양덕%오계림%류미주%류동비%반일봉%진위%류휘%증경인
纳米石墨碳%人肝细胞株%人肝癌细胞株%生长曲线%细胞周期
納米石墨碳%人肝細胞株%人肝癌細胞株%生長麯線%細胞週期
납미석묵탄%인간세포주%인간암세포주%생장곡선%세포주기
背景:有报道指出石墨碳纳米颗粒具有强大的吸附能力,只要尽可能将其控制在有效浓度范围内,石墨碳纳米颗粒会具有很好的细胞相容性、增敏效应.目的:观察石墨碳纳米颗粒对体外培养细胞的生长增殖、细胞周期及凋亡的影响.设计、时间及地点:细胞-材料学体外实验,于2007-01/2008-12在国家卫生部纳米生物技术重点实验室完成.材料:石墨碳纳米颗粒由中南大学湘雅医院卫生部肝胆肠外科研究中心自制.人肝细胞(L02)、人肝细胞(H17702)、小鼠细胞(3T3)、人肝癌细胞(HepG2)购自湘雅医院中心实验室公司.方法:取石墨碳纳米颗粒母液,稀释10倍后,采用激光粒度分析仪观察石墨碳纳米颗粒的大小及Zeta电位.取含胎牛血清的RPMI-1640培养基,设立11瓶,分别加入适量石墨碳纳米颗粒母液,使其含石墨碳纳米颗粒的浓度分别为100,75,50,25,20,15,12.5,10,7.5,5,0 mg/L.将L02细胞、H17702细胞、3T3细胞、HepG2细胞密度均调整为1×109L-1,接种后置37℃、体积分数为5%的CO2饱和湿度培养箱中,取处于指数生长期的细胞用于各项指标测定.主要观察指标:MTT比色法测定细胞数量,流式细胞仪检测细胞周期,计算细胞凋亡率.结果:石墨碳纳米颗粒的粒径约20 nm,带有负电荷,其电位值为-14.8 mV.与未加石墨碳纳米颗粒的空白对照组比较,除人肝癌细胞(HepG2)外,不同浓度的石墨碳纳米颗粒对其余3株细胞增殖均有促进作用,且浓度为7.5 mg/L时促细胞增殖作用最强.在石墨碳纳米颗粒浓度为7.5 mg/L.条件下,4株细胞的凋亡率均明显低于空白对照组.石墨碳纳米颗粒作用24 h的L02肝细胞周期发生改变,G0期细胞数减少,更多的细胞进入到S期和G2期.结论:石墨碳纳米颗粒能进入体外培养细胞内,并对细胞生长、增殖产生促进作用,不诱导细胞凋亡,其作用强度与浓度有关.
揹景:有報道指齣石墨碳納米顆粒具有彊大的吸附能力,隻要儘可能將其控製在有效濃度範圍內,石墨碳納米顆粒會具有很好的細胞相容性、增敏效應.目的:觀察石墨碳納米顆粒對體外培養細胞的生長增殖、細胞週期及凋亡的影響.設計、時間及地點:細胞-材料學體外實驗,于2007-01/2008-12在國傢衛生部納米生物技術重點實驗室完成.材料:石墨碳納米顆粒由中南大學湘雅醫院衛生部肝膽腸外科研究中心自製.人肝細胞(L02)、人肝細胞(H17702)、小鼠細胞(3T3)、人肝癌細胞(HepG2)購自湘雅醫院中心實驗室公司.方法:取石墨碳納米顆粒母液,稀釋10倍後,採用激光粒度分析儀觀察石墨碳納米顆粒的大小及Zeta電位.取含胎牛血清的RPMI-1640培養基,設立11瓶,分彆加入適量石墨碳納米顆粒母液,使其含石墨碳納米顆粒的濃度分彆為100,75,50,25,20,15,12.5,10,7.5,5,0 mg/L.將L02細胞、H17702細胞、3T3細胞、HepG2細胞密度均調整為1×109L-1,接種後置37℃、體積分數為5%的CO2飽和濕度培養箱中,取處于指數生長期的細胞用于各項指標測定.主要觀察指標:MTT比色法測定細胞數量,流式細胞儀檢測細胞週期,計算細胞凋亡率.結果:石墨碳納米顆粒的粒徑約20 nm,帶有負電荷,其電位值為-14.8 mV.與未加石墨碳納米顆粒的空白對照組比較,除人肝癌細胞(HepG2)外,不同濃度的石墨碳納米顆粒對其餘3株細胞增殖均有促進作用,且濃度為7.5 mg/L時促細胞增殖作用最彊.在石墨碳納米顆粒濃度為7.5 mg/L.條件下,4株細胞的凋亡率均明顯低于空白對照組.石墨碳納米顆粒作用24 h的L02肝細胞週期髮生改變,G0期細胞數減少,更多的細胞進入到S期和G2期.結論:石墨碳納米顆粒能進入體外培養細胞內,併對細胞生長、增殖產生促進作用,不誘導細胞凋亡,其作用彊度與濃度有關.
배경:유보도지출석묵탄납미과립구유강대적흡부능력,지요진가능장기공제재유효농도범위내,석묵탄납미과립회구유흔호적세포상용성、증민효응.목적:관찰석묵탄납미과립대체외배양세포적생장증식、세포주기급조망적영향.설계、시간급지점:세포-재료학체외실험,우2007-01/2008-12재국가위생부납미생물기술중점실험실완성.재료:석묵탄납미과립유중남대학상아의원위생부간담장외과연구중심자제.인간세포(L02)、인간세포(H17702)、소서세포(3T3)、인간암세포(HepG2)구자상아의원중심실험실공사.방법:취석묵탄납미과립모액,희석10배후,채용격광립도분석의관찰석묵탄납미과립적대소급Zeta전위.취함태우혈청적RPMI-1640배양기,설립11병,분별가입괄량석묵탄납미과립모액,사기함석묵탄납미과립적농도분별위100,75,50,25,20,15,12.5,10,7.5,5,0 mg/L.장L02세포、H17702세포、3T3세포、HepG2세포밀도균조정위1×109L-1,접충후치37℃、체적분수위5%적CO2포화습도배양상중,취처우지수생장기적세포용우각항지표측정.주요관찰지표:MTT비색법측정세포수량,류식세포의검측세포주기,계산세포조망솔.결과:석묵탄납미과립적립경약20 nm,대유부전하,기전위치위-14.8 mV.여미가석묵탄납미과립적공백대조조비교,제인간암세포(HepG2)외,불동농도적석묵탄납미과립대기여3주세포증식균유촉진작용,차농도위7.5 mg/L시촉세포증식작용최강.재석묵탄납미과립농도위7.5 mg/L.조건하,4주세포적조망솔균명현저우공백대조조.석묵탄납미과립작용24 h적L02간세포주기발생개변,G0기세포수감소,경다적세포진입도S기화G2기.결론:석묵탄납미과립능진입체외배양세포내,병대세포생장、증식산생촉진작용,불유도세포조망,기작용강도여농도유관.