生物技术通讯
生物技術通訊
생물기술통신
LETTERS IN BIOTECHNOLOGY
2009年
4期
530-533
,共4页
邢晨光%吴飞%王光路%谢希贤%徐庆阳%陈宁
邢晨光%吳飛%王光路%謝希賢%徐慶暘%陳寧
형신광%오비%왕광로%사희현%서경양%진저
嘌呤核苷磷酸化酶%原核表达%活性分析%利巴韦林
嘌呤覈苷燐痠化酶%原覈錶達%活性分析%利巴韋林
표령핵감린산화매%원핵표체%활성분석%리파위림
目的:在枯草芽孢杆菌中表达嘌呤核苷磷酸化酶(PNPase)并分析其活性.方法:将PNPase的编码基因deoD克隆入pDG148表达载体.构建原核穿梭型表达载体pDG148-deoD,采用电转化方法将表达载体转入枯草芽孢杆菌WB600后诱导表达重组PNPase;研究重组PNPase的活性.结果与结论:获得的重组PNPase活性较对照提高了193.9%,其最适催化条件为65℃、pH7.5、500 umol/L底物浓度和1%1,2,4-三氮唑-3-羧甲酰胺;对重组菌的发酵条件进行了初步优化,IPTG诱导6 h后在发酵液中添加0.5%的Tween-80能大幅度提高重组PNPase的酶活力.
目的:在枯草芽孢桿菌中錶達嘌呤覈苷燐痠化酶(PNPase)併分析其活性.方法:將PNPase的編碼基因deoD剋隆入pDG148錶達載體.構建原覈穿梭型錶達載體pDG148-deoD,採用電轉化方法將錶達載體轉入枯草芽孢桿菌WB600後誘導錶達重組PNPase;研究重組PNPase的活性.結果與結論:穫得的重組PNPase活性較對照提高瞭193.9%,其最適催化條件為65℃、pH7.5、500 umol/L底物濃度和1%1,2,4-三氮唑-3-羧甲酰胺;對重組菌的髮酵條件進行瞭初步優化,IPTG誘導6 h後在髮酵液中添加0.5%的Tween-80能大幅度提高重組PNPase的酶活力.
목적:재고초아포간균중표체표령핵감린산화매(PNPase)병분석기활성.방법:장PNPase적편마기인deoD극륭입pDG148표체재체.구건원핵천사형표체재체pDG148-deoD,채용전전화방법장표체재체전입고초아포간균WB600후유도표체중조PNPase;연구중조PNPase적활성.결과여결론:획득적중조PNPase활성교대조제고료193.9%,기최괄최화조건위65℃、pH7.5、500 umol/L저물농도화1%1,2,4-삼담서-3-최갑선알;대중조균적발효조건진행료초보우화,IPTG유도6 h후재발효액중첨가0.5%적Tween-80능대폭도제고중조PNPase적매활력.
