大豆GmERF6基因的原核表达及重组蛋白纯化
대두GmERF6기인적원핵표체급중조단백순화
Prokaryotic Expression and Protein Purification of GmERF6 Gene
  • 万方数据
    大豆科学 대두과학
    SOYBEAN SCIENCE
    2011年 6期 906-909 ,共4页

    翟莹%雷婷婷%闫帆%李艳杰%李晓薇%王英%李景文%王庆钰

    적형%뢰정정%염범%리염걸%리효미%왕영%리경문%왕경옥

    大豆%GmERF6%载体构建%原核表达%纯化 大豆%GmERF6%載體構建%原覈錶達%純化
    대두%GmERF6%재체구건%원핵표체%순화
    将大豆中已克隆的一个新的ERF转录因子基因(GmERF6)构建到原核表达载体pET28上,导入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,对其进行IPTG诱导.结果表明:在IPTG浓度为0.3 mol·L-1,诱导时间为3h时,重组蛋白得到表达,分子量大约为30 kDa.SDS-PAGE电泳结果表明重组蛋白主要以包涵体形式存在.用8mol·L-1尿素对其进行溶解后经Ni柱纯化,得到较好的纯化效果,Bradford法测定其蛋白浓度为0.56 mg·mL-1.
    장대두중이극륭적일개신적ERF전록인자기인(GmERF6)구건도원핵표체재체pET28상,도입대장간균Rosetta(DE3)중,대기진행IPTG유도.결과표명:재IPTG농도위0.3 mol·L-1,유도시간위3h시,중조단백득도표체,분자량대약위30 kDa.SDS-PAGE전영결과표명중조단백주요이포함체형식존재.용8mol·L-1뇨소대기진행용해후경Ni주순화,득도교호적순화효과,Bradford법측정기단백농도위0.56 mg·mL-1.
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