中南医学科学杂志
中南醫學科學雜誌
중남의학과학잡지
JOURNAL OF UNIVERSITY OF SOUTH CHINA(MEDICAL EDITION)
2012年
2期
131-135
,共5页
赵飞骏%张晓红%余坚%刘双全%曾铁兵%张跃军%吴移谋
趙飛駿%張曉紅%餘堅%劉雙全%曾鐵兵%張躍軍%吳移謀
조비준%장효홍%여견%류쌍전%증철병%장약군%오이모
梅毒螺旋体%Gpd%IL-2%融合表达%免疫原性
梅毒螺鏇體%Gpd%IL-2%融閤錶達%免疫原性
매독라선체%Gpd%IL-2%융합표체%면역원성
目的 以梅毒螺旋体(Tp)外膜蛋白基因Gpd及细胞因子佐剂IL-2为目的基因,融合构建原核表达干组体pET28a/Gpd-IL-2,表达鉴定并进行免疫活性的初步分析,为进一步开展Tp疫苗动物实验打下基础. 方法 定向克隆构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2进行诱导表达；Ni索和层析纯化重组融合蛋白后,Western blot 检测其免疫反应性；免疫新西兰兔评价重组蛋白的免疫原性. 结果 成功构建原核表达重组体pET28a/Gpd-IL-2,表达鉴定及纯化获得相对分子量约为60 kDa的融合蛋白；Western blot检测其能与梅毒阳性血清发生特异性结合,说明两融合基因之间的表达相互没受到太大影响；纯化的Gpd-IL-2重组蛋白免疫新西兰兔能诱导其产生特异性免疫应答,ELISA检测免疫血清中特异性抗体滴度在1∶6400以上. 结论 Gpd-IL-2融合基因重组蛋白具有良好的免疫活性,这为进一步开展Tp疫苗动物实验条件的优化打下一定的基础.
目的 以梅毒螺鏇體(Tp)外膜蛋白基因Gpd及細胞因子佐劑IL-2為目的基因,融閤構建原覈錶達榦組體pET28a/Gpd-IL-2,錶達鑒定併進行免疫活性的初步分析,為進一步開展Tp疫苗動物實驗打下基礎. 方法 定嚮剋隆構建原覈錶達重組體pET28a/Gpd-IL-2進行誘導錶達；Ni索和層析純化重組融閤蛋白後,Western blot 檢測其免疫反應性；免疫新西蘭兔評價重組蛋白的免疫原性. 結果 成功構建原覈錶達重組體pET28a/Gpd-IL-2,錶達鑒定及純化穫得相對分子量約為60 kDa的融閤蛋白；Western blot檢測其能與梅毒暘性血清髮生特異性結閤,說明兩融閤基因之間的錶達相互沒受到太大影響；純化的Gpd-IL-2重組蛋白免疫新西蘭兔能誘導其產生特異性免疫應答,ELISA檢測免疫血清中特異性抗體滴度在1∶6400以上. 結論 Gpd-IL-2融閤基因重組蛋白具有良好的免疫活性,這為進一步開展Tp疫苗動物實驗條件的優化打下一定的基礎.
목적 이매독라선체(Tp)외막단백기인Gpd급세포인자좌제IL-2위목적기인,융합구건원핵표체간조체pET28a/Gpd-IL-2,표체감정병진행면역활성적초보분석,위진일보개전Tp역묘동물실험타하기출. 방법 정향극륭구건원핵표체중조체pET28a/Gpd-IL-2진행유도표체；Ni색화층석순화중조융합단백후,Western blot 검측기면역반응성；면역신서란토평개중조단백적면역원성. 결과 성공구건원핵표체중조체pET28a/Gpd-IL-2,표체감정급순화획득상대분자량약위60 kDa적융합단백；Western blot검측기능여매독양성혈청발생특이성결합,설명량융합기인지간적표체상호몰수도태대영향；순화적Gpd-IL-2중조단백면역신서란토능유도기산생특이성면역응답,ELISA검측면역혈청중특이성항체적도재1∶6400이상. 결론 Gpd-IL-2융합기인중조단백구유량호적면역활성,저위진일보개전Tp역묘동물실험조건적우화타하일정적기출.
