浙江农业学报
浙江農業學報
절강농업학보
ACTA AGRICULTURAE ZHEJIANGENSIS
2012年
5期
914-921
,共8页
张巧艳%陈亭亭%陈笑芸%杨胜利%缪青梅
張巧豔%陳亭亭%陳笑蕓%楊勝利%繆青梅
장교염%진정정%진소예%양성리%무청매
沙门氏菌%荧光定量PCR%SYBR Green Ⅰ%DNA提取%生乳%乳制品
沙門氏菌%熒光定量PCR%SYBR Green Ⅰ%DNA提取%生乳%乳製品
사문씨균%형광정량PCR%SYBR Green Ⅰ%DNA제취%생유%유제품
生乳易受沙门氏菌污染,并大量繁殖;经加工的乳制品细菌数大大减少,但仍存在沙门氏菌污染的风险.试验按生乳及乳制品沙门氏菌污染水平研究样品前处理方法,采用煮沸裂解法快速提取总DNA,针对沙门氏菌invA基因建立SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR快速检测技术.建立的方法具有良好的特异性和较高的灵敏度,其中生乳沙门氏菌检出限为102 cfu· mL-1,方法的检测线性范围为102-108 cfu·mL-1,相关系数(R2)为0.999,扩增效率为103%;乳制品沙门氏菌经16 h增菌后检出限达到1 cfu·[25 g(mL)]-1.该技术可用于生乳中沙门氏菌的高效筛查及定量检测,检测一个样品仅需3 h;同时,可用于乳制品的准确定性检测,检测周期为1d;且方法重复性好、准确度高、操作简单,为乳制品企业快速检测沙门氏菌提供了有效的技术手段.
生乳易受沙門氏菌汙染,併大量繁殖;經加工的乳製品細菌數大大減少,但仍存在沙門氏菌汙染的風險.試驗按生乳及乳製品沙門氏菌汙染水平研究樣品前處理方法,採用煮沸裂解法快速提取總DNA,針對沙門氏菌invA基因建立SYBR Green Ⅰ熒光定量PCR快速檢測技術.建立的方法具有良好的特異性和較高的靈敏度,其中生乳沙門氏菌檢齣限為102 cfu· mL-1,方法的檢測線性範圍為102-108 cfu·mL-1,相關繫數(R2)為0.999,擴增效率為103%;乳製品沙門氏菌經16 h增菌後檢齣限達到1 cfu·[25 g(mL)]-1.該技術可用于生乳中沙門氏菌的高效篩查及定量檢測,檢測一箇樣品僅需3 h;同時,可用于乳製品的準確定性檢測,檢測週期為1d;且方法重複性好、準確度高、操作簡單,為乳製品企業快速檢測沙門氏菌提供瞭有效的技術手段.
생유역수사문씨균오염,병대량번식;경가공적유제품세균수대대감소,단잉존재사문씨균오염적풍험.시험안생유급유제품사문씨균오염수평연구양품전처리방법,채용자비렬해법쾌속제취총DNA,침대사문씨균invA기인건립SYBR Green Ⅰ형광정량PCR쾌속검측기술.건립적방법구유량호적특이성화교고적령민도,기중생유사문씨균검출한위102 cfu· mL-1,방법적검측선성범위위102-108 cfu·mL-1,상관계수(R2)위0.999,확증효솔위103%;유제품사문씨균경16 h증균후검출한체도1 cfu·[25 g(mL)]-1.해기술가용우생유중사문씨균적고효사사급정량검측,검측일개양품부수3 h;동시,가용우유제품적준학정성검측,검측주기위1d;차방법중복성호、준학도고、조작간단,위유제품기업쾌속검측사문씨균제공료유효적기술수단.