中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2003年
3期
162-165
,共4页
龚国忠%蒋永芳%朱映华%苏先狮
龔國忠%蔣永芳%硃映華%囌先獅
공국충%장영방%주영화%소선사
肝炎病毒,丙型%p53蛋白%NS5A%荧光素酶活性
肝炎病毒,丙型%p53蛋白%NS5A%熒光素酶活性
간염병독,병형%p53단백%NS5A%형광소매활성
目的研究HCV NS5A对抑癌蛋白p5 3活性的抑制作用及其作用机制.方法采用荧光素酶报告基因系统观察pwwp-luc,pwwp-mut-luc,pC53-NS3及pCNS5A分别转染或共同转染HepG2、Huh7细胞的荧光素酶活性.应用凝胶滞留试验观察HCV NS5A是否影响p5 3与其特异DNA序列的结合.结果内源性p5 3能激活p21启动子转录功能,使荧光素酶活性明显增加(3.49×105与0.60×105,t=5.92,P＜0.01).外源性p 5 3也能激活p21启动子转录功能,荧光素酶活性为5.6 3×105,与对照组(0.47×105)比较差异具有显著性(t=10.12,P＜0.01).HCV NS5A能抑制内源性和外源性p5 3对p21启动子的激活作用,并呈剂量依赖性(F≥20.71,P＜0.01).凝胶滞留试验显示HCV NS5A能阻碍p5 3与其特异DNA序列的结合.结论HCV NS5A能抑制p5 3的反式激活功能使其目的基因p21启动子的转录功能下降,其机制是HCV NS5A能阻碍p 5 3与其特异DNA序列的结合.
目的研究HCV NS5A對抑癌蛋白p5 3活性的抑製作用及其作用機製.方法採用熒光素酶報告基因繫統觀察pwwp-luc,pwwp-mut-luc,pC53-NS3及pCNS5A分彆轉染或共同轉染HepG2、Huh7細胞的熒光素酶活性.應用凝膠滯留試驗觀察HCV NS5A是否影響p5 3與其特異DNA序列的結閤.結果內源性p5 3能激活p21啟動子轉錄功能,使熒光素酶活性明顯增加(3.49×105與0.60×105,t=5.92,P＜0.01).外源性p 5 3也能激活p21啟動子轉錄功能,熒光素酶活性為5.6 3×105,與對照組(0.47×105)比較差異具有顯著性(t=10.12,P＜0.01).HCV NS5A能抑製內源性和外源性p5 3對p21啟動子的激活作用,併呈劑量依賴性(F≥20.71,P＜0.01).凝膠滯留試驗顯示HCV NS5A能阻礙p5 3與其特異DNA序列的結閤.結論HCV NS5A能抑製p5 3的反式激活功能使其目的基因p21啟動子的轉錄功能下降,其機製是HCV NS5A能阻礙p 5 3與其特異DNA序列的結閤.
목적연구HCV NS5A대억암단백p5 3활성적억제작용급기작용궤제.방법채용형광소매보고기인계통관찰pwwp-luc,pwwp-mut-luc,pC53-NS3급pCNS5A분별전염혹공동전염HepG2、Huh7세포적형광소매활성.응용응효체류시험관찰HCV NS5A시부영향p5 3여기특이DNA서렬적결합.결과내원성p5 3능격활p21계동자전록공능,사형광소매활성명현증가(3.49×105여0.60×105,t=5.92,P＜0.01).외원성p 5 3야능격활p21계동자전록공능,형광소매활성위5.6 3×105,여대조조(0.47×105)비교차이구유현저성(t=10.12,P＜0.01).HCV NS5A능억제내원성화외원성p5 3대p21계동자적격활작용,병정제량의뢰성(F≥20.71,P＜0.01).응효체류시험현시HCV NS5A능조애p5 3여기특이DNA서렬적결합.결론HCV NS5A능억제p5 3적반식격활공능사기목적기인p21계동자적전록공능하강,기궤제시HCV NS5A능조애p 5 3여기특이DNA서렬적결합.
