中华肝脏病杂志
中華肝髒病雜誌
중화간장병잡지
CHINESE JOURNAL OF HEPATOLOGY
2006年
7期
529-531
,共3页
刘重阳%刘为纹%陈东风%王军
劉重暘%劉為紋%陳東風%王軍
류중양%류위문%진동풍%왕군
肝炎病毒,乙型%肝炎病毒,丙型%X蛋白%病毒核心蛋白%癌,肝细胞
肝炎病毒,乙型%肝炎病毒,丙型%X蛋白%病毒覈心蛋白%癌,肝細胞
간염병독,을형%간염병독,병형%X단백%병독핵심단백%암,간세포
目的建立乙型肝炎病毒X基因-丙型肝炎病毒C基因(HBV X-HCV C)共表达HepG2细胞模型,并探讨其对血管内皮细胞生长因子表达的影响.方法双酶切质粒pXT1-X,得到完整的HBV X基因片段后,将其插入到质粒PBK-CMV和PBK-HCV C的相应酶切位点,得到重组质粒PBK-X和PBK-X-C;再将质粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C分别导入肝癌细胞株HepG2中,G418筛选,逆转录聚合酶链反应、Western blot鉴定HBVX和HCV C蛋白表达;免疫组织化学、Western blot检测血管内皮细胞生长因子蛋白质表达.结果质粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C在HepG2细胞中有稳定表达.共表达HBV X-HCV C蛋白的细胞血管内皮细胞生长因子蛋白质表达较转染空载体的细胞及单独表达HBV X、HCV C蛋白的细胞明显升高.结论HBV X-HCV C共表达能显著上调血管内皮细胞生长因子蛋白质表达,提示HBV、HCV可能具有协同致癌作用.
目的建立乙型肝炎病毒X基因-丙型肝炎病毒C基因(HBV X-HCV C)共錶達HepG2細胞模型,併探討其對血管內皮細胞生長因子錶達的影響.方法雙酶切質粒pXT1-X,得到完整的HBV X基因片段後,將其插入到質粒PBK-CMV和PBK-HCV C的相應酶切位點,得到重組質粒PBK-X和PBK-X-C;再將質粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C分彆導入肝癌細胞株HepG2中,G418篩選,逆轉錄聚閤酶鏈反應、Western blot鑒定HBVX和HCV C蛋白錶達;免疫組織化學、Western blot檢測血管內皮細胞生長因子蛋白質錶達.結果質粒PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C和PBK-X-C在HepG2細胞中有穩定錶達.共錶達HBV X-HCV C蛋白的細胞血管內皮細胞生長因子蛋白質錶達較轉染空載體的細胞及單獨錶達HBV X、HCV C蛋白的細胞明顯升高.結論HBV X-HCV C共錶達能顯著上調血管內皮細胞生長因子蛋白質錶達,提示HBV、HCV可能具有協同緻癌作用.
목적건립을형간염병독X기인-병형간염병독C기인(HBV X-HCV C)공표체HepG2세포모형,병탐토기대혈관내피세포생장인자표체적영향.방법쌍매절질립pXT1-X,득도완정적HBV X기인편단후,장기삽입도질립PBK-CMV화PBK-HCV C적상응매절위점,득도중조질립PBK-X화PBK-X-C;재장질립PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C화PBK-X-C분별도입간암세포주HepG2중,G418사선,역전록취합매련반응、Western blot감정HBVX화HCV C단백표체;면역조직화학、Western blot검측혈관내피세포생장인자단백질표체.결과질립PBK-CMV、PBK-X、PBK-HCV C화PBK-X-C재HepG2세포중유은정표체.공표체HBV X-HCV C단백적세포혈관내피세포생장인자단백질표체교전염공재체적세포급단독표체HBV X、HCV C단백적세포명현승고.결론HBV X-HCV C공표체능현저상조혈관내피세포생장인자단백질표체,제시HBV、HCV가능구유협동치암작용.
