中国生物工程杂志
中國生物工程雜誌
중국생물공정잡지
JOURNAL OF CHINESE BIOTECHNOLOGY
2006年
5期
74-77
,共4页
魏兰珍%崔轶文%马为民%王全喜
魏蘭珍%崔軼文%馬為民%王全喜
위란진%최질문%마위민%왕전희
果糖-1,6-二磷酸醛缩酶%鱼腥藻7120%表达%酶活
果糖-1,6-二燐痠醛縮酶%魚腥藻7120%錶達%酶活
과당-1,6-이린산철축매%어성조7120%표체%매활
随着更多蓝藻全基因组序列测定完成,蓝藻基因工程研究现已进入后基因组时代.2001年Kaneko等完成了鱼腥藻7120全基因组序列测定,随后人们利用生物信息学的方法对其中一些基因的功能进行了预测,包括Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶(FBA)基因,但该基因是否编码Ⅱ型果糖-1,6-二磷酸醛缩酶及该产物的相关酶学特性至今尚未见报道.通过PCR克隆到鱼腥藻7120中预测的Ⅱ型FBA基因,插入到质粒pET-32a的相应位点,构建成原核表达载体pET-FBA-Ⅱ.蛋白电泳结果显示,重组蛋白的表达量占总蛋白含量的23.4%,与蛋白分子标记相比,其分子量约为40 kDa.酶学活性测定结果表明,其蛋白粗提物的比活力为11.8 U(mg protein)-1,具有标准Ⅱ型FBA活性.证实了Cyanobase中关于该基因功能的预测,也为进一步研究该基因表达产物的生理生化特性及功能提供了重要资料.
隨著更多藍藻全基因組序列測定完成,藍藻基因工程研究現已進入後基因組時代.2001年Kaneko等完成瞭魚腥藻7120全基因組序列測定,隨後人們利用生物信息學的方法對其中一些基因的功能進行瞭預測,包括Ⅱ型果糖-1,6-二燐痠醛縮酶(FBA)基因,但該基因是否編碼Ⅱ型果糖-1,6-二燐痠醛縮酶及該產物的相關酶學特性至今尚未見報道.通過PCR剋隆到魚腥藻7120中預測的Ⅱ型FBA基因,插入到質粒pET-32a的相應位點,構建成原覈錶達載體pET-FBA-Ⅱ.蛋白電泳結果顯示,重組蛋白的錶達量佔總蛋白含量的23.4%,與蛋白分子標記相比,其分子量約為40 kDa.酶學活性測定結果錶明,其蛋白粗提物的比活力為11.8 U(mg protein)-1,具有標準Ⅱ型FBA活性.證實瞭Cyanobase中關于該基因功能的預測,也為進一步研究該基因錶達產物的生理生化特性及功能提供瞭重要資料.
수착경다람조전기인조서렬측정완성,람조기인공정연구현이진입후기인조시대.2001년Kaneko등완성료어성조7120전기인조서렬측정,수후인문이용생물신식학적방법대기중일사기인적공능진행료예측,포괄Ⅱ형과당-1,6-이린산철축매(FBA)기인,단해기인시부편마Ⅱ형과당-1,6-이린산철축매급해산물적상관매학특성지금상미견보도.통과PCR극륭도어성조7120중예측적Ⅱ형FBA기인,삽입도질립pET-32a적상응위점,구건성원핵표체재체pET-FBA-Ⅱ.단백전영결과현시,중조단백적표체량점총단백함량적23.4%,여단백분자표기상비,기분자량약위40 kDa.매학활성측정결과표명,기단백조제물적비활력위11.8 U(mg protein)-1,구유표준Ⅱ형FBA활성.증실료Cyanobase중관우해기인공능적예측,야위진일보연구해기인표체산물적생리생화특성급공능제공료중요자료.
