中国脊柱脊髓杂志
中國脊柱脊髓雜誌
중국척주척수잡지
CHINESE JOURNAL OF SPINE AND SPINAL CORD
2008年
9期
680-683,Ⅲ
,共5页
魏见伟%王德春%胡有谷
魏見偉%王德春%鬍有穀
위견위%왕덕춘%호유곡
基质金属蛋白酶组织抑制剂1%蛋白多糖%腺相关病毒%椎间盘
基質金屬蛋白酶組織抑製劑1%蛋白多糖%腺相關病毒%椎間盤
기질금속단백매조직억제제1%단백다당%선상관병독%추간반
目的:探讨腺相关病毒(Adeno-associated virus;AAV)载体介导的基质金属蛋白酶组织抑制剂1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1;TIMP1)对人退变腰椎间盘髓核细胞的生物学效应.方法:单层培养并鉴定人退变腰椎间盘髓核细胞.采用绿色荧光蛋白标记的腺相关病毒(rAAV2-EGFP)检测其对髓核细胞的转染效率.应用构建的rAAV2-TIMP1转染髓核细胞;通过细胞形态学观察、35S标记氨基酸整合法检测rAAV2-TIMP1对人退变腰椎问盘髓核细胞基质合成的影响.在35S检测中;以未转染的退变髓核细胞做为正常对照组.结果:光镜下观察所培养的细胞类型以成纤维样细胞为主;Ⅱ型胶原免疫组化和番红O染色鉴定培养细胞为髓核细胞.AAV转染人退变腰椎间盘髓核细胞的转染效率为12%.35S标记整合法检测rAAV2-TIMP1转染组每分钟计数值为341.43±42.85;正常对照组为224.20±29.26;两组间比较差异有统计学意义(P<0.05).结论:TIMP1能够促进退变椎间盘髓核细胞蛋白多糖的合成.
目的:探討腺相關病毒(Adeno-associated virus;AAV)載體介導的基質金屬蛋白酶組織抑製劑1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1;TIMP1)對人退變腰椎間盤髓覈細胞的生物學效應.方法:單層培養併鑒定人退變腰椎間盤髓覈細胞.採用綠色熒光蛋白標記的腺相關病毒(rAAV2-EGFP)檢測其對髓覈細胞的轉染效率.應用構建的rAAV2-TIMP1轉染髓覈細胞;通過細胞形態學觀察、35S標記氨基痠整閤法檢測rAAV2-TIMP1對人退變腰椎問盤髓覈細胞基質閤成的影響.在35S檢測中;以未轉染的退變髓覈細胞做為正常對照組.結果:光鏡下觀察所培養的細胞類型以成纖維樣細胞為主;Ⅱ型膠原免疫組化和番紅O染色鑒定培養細胞為髓覈細胞.AAV轉染人退變腰椎間盤髓覈細胞的轉染效率為12%.35S標記整閤法檢測rAAV2-TIMP1轉染組每分鐘計數值為341.43±42.85;正常對照組為224.20±29.26;兩組間比較差異有統計學意義(P<0.05).結論:TIMP1能夠促進退變椎間盤髓覈細胞蛋白多糖的閤成.
목적:탐토선상관병독(Adeno-associated virus;AAV)재체개도적기질금속단백매조직억제제1(tissue inhibitor of metalloproteinases 1;TIMP1)대인퇴변요추간반수핵세포적생물학효응.방법:단층배양병감정인퇴변요추간반수핵세포.채용록색형광단백표기적선상관병독(rAAV2-EGFP)검측기대수핵세포적전염효솔.응용구건적rAAV2-TIMP1전염수핵세포;통과세포형태학관찰、35S표기안기산정합법검측rAAV2-TIMP1대인퇴변요추문반수핵세포기질합성적영향.재35S검측중;이미전염적퇴변수핵세포주위정상대조조.결과:광경하관찰소배양적세포류형이성섬유양세포위주;Ⅱ형효원면역조화화번홍O염색감정배양세포위수핵세포.AAV전염인퇴변요추간반수핵세포적전염효솔위12%.35S표기정합법검측rAAV2-TIMP1전염조매분종계수치위341.43±42.85;정상대조조위224.20±29.26;량조간비교차이유통계학의의(P<0.05).결론:TIMP1능구촉진퇴변추간반수핵세포단백다당적합성.