CAJ | 학술논문

目的获取伪旋毛虫(Trichinella pseudospiralis)肌幼虫时期抗原性基因.方法利用λZAP载体构建伪旋毛虫肌幼虫cDNA表达文库;以感染伪旋毛虫60天后的猪血清为抗体探针,对伪旋毛虫肌幼虫cDNA文库进行免疫学筛选,对筛选出的强反应原性克隆进行测序,利用相关分子生物学软件进行序列分析.结果构建的伪旋毛虫cDNA表达文库的库容量为0.55×106pfu,重组率为95.6%,扩增后文库滴度为1.2×1010 pfu/mL.从2.0×105个重组噬菌体筛选获得阳性克隆27个.序列分析结果表明这27个阳性克隆共编码7种cDNA分子,其编码的类似蛋白分别为伪旋毛虫Tp21kDa蛋白、伪旋毛虫Tp28kDa蛋白、蛋白酶体激活因子亚单位(Proteasome activator subunit)类蛋白、Nudix水解酶(Nudix hydrolyase)类蛋白、凝集因子(Condensin)类蛋白、尿嘧啶糖基化酶(uracil glycosylase)类蛋白和一个未知蛋白.结论获得两个反应原性较强且高拷贝的抗原基因,其分别编码Tp21kDa蛋白及蛋白酶体激活因子亚单位.
목적 획취위선모충(Trichinella pseudospiralis)기유충시기항원성기인.방법 이용λZAP재체구건위선모충기유충cDNA표체문고;이감염위선모충60천후적저혈청위항체탐침,대위선모충기유충cDNA문고진행면역학사선,대사선출적강반응원성극륭진행측서,이용상관분자생물학연건진행서렬분석.결과 구건적위선모충cDNA표체문고적고용량위0.55×106pfu,중조솔위95.6%,확증후문고적도위1.2×1010 pfu/mL.종2.0×105개중조서균체사선획득양성극륭27개.서렬분석결과표명저27개양성극륭공편마7충cDNA분자,기편마적유사단백분별위위선모충Tp21kDa단백、위선모충Tp28kDa단백、단백매체격활인자아단위(Proteasome activator subunit)류단백、Nudix수해매(Nudix hydrolyase)류단백、응집인자(Condensin)류단백、뇨밀정당기화매(uracil glycosylase)류단백화일개미지단백.결론 획득량개반응원성교강차고고패적항원기인,기분별편마Tp21kDa단백급단백매체격활인자아단위.