广东医学
廣東醫學
엄동의학
GUNAGDONG MEDICAL JOURNAL
2009年
2期
191-193
,共3页
王毅飞%蔡德鸿%陈宏%莫永炎%伊娜%邢飞跃
王毅飛%蔡德鴻%陳宏%莫永炎%伊娜%邢飛躍
왕의비%채덕홍%진굉%막영염%이나%형비약
糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白%融合蛋白%原核蛋白%构建%纯化
糖皮質激素誘導亮氨痠拉鏈蛋白%融閤蛋白%原覈蛋白%構建%純化
당피질격소유도량안산랍련단백%융합단백%원핵단백%구건%순화
目的 获取糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白(GILZ)的His融合蛋白,为下阶段深入研究GILZ的结构、功能及筛取与其相互作用的蛋白打下基础.方法 利用基因工程技术,BarnH I/Xho I酶切真核表达质粒HA-GILZ/PcDNA3获得GILZ cDNA,重组于能表达6个组氨酸残基的原核表达质粒pET-30a中.然后用该亚克隆重组质粒转化大肠杆茵BL21(DE3),用IPTG诱导表达,用Ni2+-NTA柱纯化.结果 亚克隆获得CILZ/pET-30a高效原核表达重组载体,诱导表达的融合蛋白占细菌总蛋白高达40%以上,纯化的蛋白分子量约为24 kD.结论 成功构建His-GILZ融合蛋白原核表达载体,并高效表达、纯化,为进一步研究其结构功能关系和临床应用奠定了基础.
目的 穫取糖皮質激素誘導亮氨痠拉鏈蛋白(GILZ)的His融閤蛋白,為下階段深入研究GILZ的結構、功能及篩取與其相互作用的蛋白打下基礎.方法 利用基因工程技術,BarnH I/Xho I酶切真覈錶達質粒HA-GILZ/PcDNA3穫得GILZ cDNA,重組于能錶達6箇組氨痠殘基的原覈錶達質粒pET-30a中.然後用該亞剋隆重組質粒轉化大腸桿茵BL21(DE3),用IPTG誘導錶達,用Ni2+-NTA柱純化.結果 亞剋隆穫得CILZ/pET-30a高效原覈錶達重組載體,誘導錶達的融閤蛋白佔細菌總蛋白高達40%以上,純化的蛋白分子量約為24 kD.結論 成功構建His-GILZ融閤蛋白原覈錶達載體,併高效錶達、純化,為進一步研究其結構功能關繫和臨床應用奠定瞭基礎.
목적 획취당피질격소유도량안산랍련단백(GILZ)적His융합단백,위하계단심입연구GILZ적결구、공능급사취여기상호작용적단백타하기출.방법 이용기인공정기술,BarnH I/Xho I매절진핵표체질립HA-GILZ/PcDNA3획득GILZ cDNA,중조우능표체6개조안산잔기적원핵표체질립pET-30a중.연후용해아극륭중조질립전화대장간인BL21(DE3),용IPTG유도표체,용Ni2+-NTA주순화.결과 아극륭획득CILZ/pET-30a고효원핵표체중조재체,유도표체적융합단백점세균총단백고체40%이상,순화적단백분자량약위24 kD.결론 성공구건His-GILZ융합단백원핵표체재체,병고효표체、순화,위진일보연구기결구공능관계화림상응용전정료기출.
