CAJ | 학술논문

为研究乐果对大鼠肝细胞凋亡的影响,将24只SD大鼠分成对照组和3个染毒组,分别按体质量以0、1、6和30 mg·kg-1的剂量灌服乐果,连续灌服30 d后,观察肝脏组织学和超微结构变化.同时,通过给大鼠肝细胞培养液中加入乐果(染毒终浓度分别为0、3、10、30、100和300 μmol·L-1),染毒12、24 h后,Annexin V/PI双染法检测肝细胞凋亡率;分别用Fluo-2/AM、双氢-乙酰乙酸二氯荧光黄(DCFH-DA)和罗丹明123检测细胞内Ca2+浓度、活性氧(ROS)和线粒体膜电位(△ψm)变化.结果表明,组织学和超微结构检查显示肝细胞脂肪变性、凋亡等.肝细胞染毒12和24 h后,细胞凋亡率明显升高,除3 μmol·L-1组外,与对照组相比差异显著(P<0.05或P<0.01),且呈时间-剂量效应;3μmol·L-1组细胞内Ca2+浓度极显著高于对照组(P<0.01),之后随染毒剂量的增加,细胞内Ca2+浓度逐渐下降;细胞内ROS水平在3～100μmol·L-1范围内随染毒剂量的增大和染毒时间的延长而升高,而在300 μmol·L-1组略有下降,除3μmol·L-1组外,与对照组相比均差异极显著(P<0.01);△ψm除24 h高剂量染毒组(300 μmol·L-1)外均出现持续下降,30～300 μmol·L-1组均小于对照组(P<0.01).本研究表明低剂量乐果染毒可诱导肝细胞发生凋亡,细胞内Ca2+、ROS和△ψm可能参与了这一过程.
위연구악과대대서간세포조망적영향,장24지SD대서분성대조조화3개염독조,분별안체질량이0、1、6화30 mg·kg-1적제량관복악과,련속관복30 d후,관찰간장조직학화초미결구변화.동시,통과급대서간세포배양액중가입악과(염독종농도분별위0、3、10、30、100화300 μmol·L-1),염독12、24 h후,Annexin V/PI쌍염법검측간세포조망솔;분별용Fluo-2/AM、쌍경-을선을산이록형광황(DCFH-DA)화라단명123검측세포내Ca2+농도、활성양(ROS)화선립체막전위(△ψm)변화.결과표명,조직학화초미결구검사현시간세포지방변성、조망등.간세포염독12화24 h후,세포조망솔명현승고,제3 μmol·L-1조외,여대조조상비차이현저(P<0.05혹P<0.01),차정시간-제량효응;3μmol·L-1조세포내Ca2+농도겁현저고우대조조(P<0.01),지후수염독제량적증가,세포내Ca2+농도축점하강;세포내ROS수평재3～100μmol·L-1범위내수염독제량적증대화염독시간적연장이승고,이재300 μmol·L-1조략유하강,제3μmol·L-1조외,여대조조상비균차이겁현저(P<0.01);△ψm제24 h고제량염독조(300 μmol·L-1)외균출현지속하강,30～300 μmol·L-1조균소우대조조(P<0.01).본연구표명저제량악과염독가유도간세포발생조망,세포내Ca2+、ROS화△ψm가능삼여료저일과정.