中国免疫学杂志
中國免疫學雜誌
중국면역학잡지
CHINESE JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2011年
1期
25-28,33
,共5页
郭静雅%朱华亭%陈昌友%黄莉%刘玉华%孙杰%张彦军%黄赛男%邱玉华
郭靜雅%硃華亭%陳昌友%黃莉%劉玉華%孫傑%張彥軍%黃賽男%邱玉華
곽정아%주화정%진창우%황리%류옥화%손걸%장언군%황새남%구옥화
CXCR3%B16细胞%基因转染%肿瘤转移%细胞迁移
CXCR3%B16細胞%基因轉染%腫瘤轉移%細胞遷移
CXCR3%B16세포%기인전염%종류전이%세포천이
目的:建立稳定表达小鼠CXCR3基因的B16细胞株,研究CXCR3分子在肿瘤形成及转移过程中的作用.方法:采用PCR方法从pMD19-T/mCXCR3质粒中扩增CXCR3基因,插入到真核表达载体pIRES2-EGFP中,脂质体法转染小鼠黑色素瘤细胞B16;G418加压筛选阳性克隆,分别用RT-PCR方法与免疫荧光技术分析阳性克隆中CXCR3在mRNA和蛋白水平的表达.采用Transwell系统检测B16-mCXCR3细胞在其配体IP-10介导下的迁移能力.将B16-mCXCR3细胞分别通过皮下和眼静脉注射接种于BALB/c小鼠,观察在小鼠体内的成瘤率及肿瘤转移情况.结果:构建了表达小鼠CXCR3基因的真核表达载体pIRES2-EGFP/mCXCR3,转染该载体后获得了稳定表达CXCR3的B16-mCXCR3细胞.B16-mCXCR3细胞(1×105个),在20 ìg/L IP-10作用下迁移的细胞数为3 208个,与B16组和B16-mock组相比均具有统计学意义(P＜0.01).于小鼠皮下接种B16-mCXCR3细胞、B16细胞和B16-mock细胞,第20天成瘤率均为100%.于小鼠眼静脉注射B16-mCXCR3细胞,第21天时50%的小鼠在肺部出现肉眼可见的黑色肿瘤转移灶,B16细胞组和B16-mock细胞组肺部未见肿瘤转移灶,B16-mCXCR3组与B16组和B16-mock组相比均具有统计学意义(P＜0.01).结论:转染CXCR3基因的B16-mCXCR3细胞,在IP-10介导下可定向迁移,并可增加在小鼠体内的转移率.
目的:建立穩定錶達小鼠CXCR3基因的B16細胞株,研究CXCR3分子在腫瘤形成及轉移過程中的作用.方法:採用PCR方法從pMD19-T/mCXCR3質粒中擴增CXCR3基因,插入到真覈錶達載體pIRES2-EGFP中,脂質體法轉染小鼠黑色素瘤細胞B16;G418加壓篩選暘性剋隆,分彆用RT-PCR方法與免疫熒光技術分析暘性剋隆中CXCR3在mRNA和蛋白水平的錶達.採用Transwell繫統檢測B16-mCXCR3細胞在其配體IP-10介導下的遷移能力.將B16-mCXCR3細胞分彆通過皮下和眼靜脈註射接種于BALB/c小鼠,觀察在小鼠體內的成瘤率及腫瘤轉移情況.結果:構建瞭錶達小鼠CXCR3基因的真覈錶達載體pIRES2-EGFP/mCXCR3,轉染該載體後穫得瞭穩定錶達CXCR3的B16-mCXCR3細胞.B16-mCXCR3細胞(1×105箇),在20 ìg/L IP-10作用下遷移的細胞數為3 208箇,與B16組和B16-mock組相比均具有統計學意義(P＜0.01).于小鼠皮下接種B16-mCXCR3細胞、B16細胞和B16-mock細胞,第20天成瘤率均為100%.于小鼠眼靜脈註射B16-mCXCR3細胞,第21天時50%的小鼠在肺部齣現肉眼可見的黑色腫瘤轉移竈,B16細胞組和B16-mock細胞組肺部未見腫瘤轉移竈,B16-mCXCR3組與B16組和B16-mock組相比均具有統計學意義(P＜0.01).結論:轉染CXCR3基因的B16-mCXCR3細胞,在IP-10介導下可定嚮遷移,併可增加在小鼠體內的轉移率.
목적:건립은정표체소서CXCR3기인적B16세포주,연구CXCR3분자재종류형성급전이과정중적작용.방법:채용PCR방법종pMD19-T/mCXCR3질립중확증CXCR3기인,삽입도진핵표체재체pIRES2-EGFP중,지질체법전염소서흑색소류세포B16;G418가압사선양성극륭,분별용RT-PCR방법여면역형광기술분석양성극륭중CXCR3재mRNA화단백수평적표체.채용Transwell계통검측B16-mCXCR3세포재기배체IP-10개도하적천이능력.장B16-mCXCR3세포분별통과피하화안정맥주사접충우BALB/c소서,관찰재소서체내적성류솔급종류전이정황.결과:구건료표체소서CXCR3기인적진핵표체재체pIRES2-EGFP/mCXCR3,전염해재체후획득료은정표체CXCR3적B16-mCXCR3세포.B16-mCXCR3세포(1×105개),재20 ìg/L IP-10작용하천이적세포수위3 208개,여B16조화B16-mock조상비균구유통계학의의(P＜0.01).우소서피하접충B16-mCXCR3세포、B16세포화B16-mock세포,제20천성류솔균위100%.우소서안정맥주사B16-mCXCR3세포,제21천시50%적소서재폐부출현육안가견적흑색종류전이조,B16세포조화B16-mock세포조폐부미견종류전이조,B16-mCXCR3조여B16조화B16-mock조상비균구유통계학의의(P＜0.01).결론:전염CXCR3기인적B16-mCXCR3세포,재IP-10개도하가정향천이,병가증가재소서체내적전이솔.
