江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2012年
2期
290-295
,共6页
徐秋芳%张金凤%张晓霞%熊如意%周益军
徐鞦芳%張金鳳%張曉霞%熊如意%週益軍
서추방%장금봉%장효하%웅여의%주익군
水稻黑条矮缩病毒%南方水稻黑条矮缩病毒%重组PCR%融合基因%RNA沉默载体
水稻黑條矮縮病毒%南方水稻黑條矮縮病毒%重組PCR%融閤基因%RNA沉默載體
수도흑조왜축병독%남방수도흑조왜축병독%중조PCR%융합기인%RNA침묵재체
为利用RNAi技术获取抗水稻黑条矮缩病毒(RBSDV)和南方水稻黑条矮缩病毒(SRBSDV)植株,分别针对两种病毒的S6和S10基因构建RNA沉默载体.采用重组PCR方法将RBSDVS6基因片段(R6)和SRBSDVS6基因片段(SR6)进行融合,获得600 bp的R6-SR6融合基因；将RBSDV S10基因片段(R10)和SRBSDV S10基因片段(SR10)进行融合,获得600 bp的R10-SR10融合基因.融合基因以反向重复的方式连入pBS载体,并定向插入到pCAMBIA1301载体上,获取了含有发夹结构的植物表达载体pCAMBIA1301 -hp(R6-SR6)和pCAMBIA1301-hp(R10-SR10).抗RBSDV和SRBSDV RNA沉默载体的构建为利用RNA沉默进行植物抗病毒研究奠定了基础.
為利用RNAi技術穫取抗水稻黑條矮縮病毒(RBSDV)和南方水稻黑條矮縮病毒(SRBSDV)植株,分彆針對兩種病毒的S6和S10基因構建RNA沉默載體.採用重組PCR方法將RBSDVS6基因片段(R6)和SRBSDVS6基因片段(SR6)進行融閤,穫得600 bp的R6-SR6融閤基因；將RBSDV S10基因片段(R10)和SRBSDV S10基因片段(SR10)進行融閤,穫得600 bp的R10-SR10融閤基因.融閤基因以反嚮重複的方式連入pBS載體,併定嚮插入到pCAMBIA1301載體上,穫取瞭含有髮夾結構的植物錶達載體pCAMBIA1301 -hp(R6-SR6)和pCAMBIA1301-hp(R10-SR10).抗RBSDV和SRBSDV RNA沉默載體的構建為利用RNA沉默進行植物抗病毒研究奠定瞭基礎.
위이용RNAi기술획취항수도흑조왜축병독(RBSDV)화남방수도흑조왜축병독(SRBSDV)식주,분별침대량충병독적S6화S10기인구건RNA침묵재체.채용중조PCR방법장RBSDVS6기인편단(R6)화SRBSDVS6기인편단(SR6)진행융합,획득600 bp적R6-SR6융합기인；장RBSDV S10기인편단(R10)화SRBSDV S10기인편단(SR10)진행융합,획득600 bp적R10-SR10융합기인.융합기인이반향중복적방식련입pBS재체,병정향삽입도pCAMBIA1301재체상,획취료함유발협결구적식물표체재체pCAMBIA1301 -hp(R6-SR6)화pCAMBIA1301-hp(R10-SR10).항RBSDV화SRBSDV RNA침묵재체적구건위이용RNA침묵진행식물항병독연구전정료기출.
