上海免疫学杂志
上海免疫學雜誌
상해면역학잡지
SHANGHAI JOURNAL OF IMMUNOLOGY
2003年
1期
16-19,57
,共5页
张天祥%郭礼和%蔡仙德%苏宁%王立新
張天祥%郭禮和%蔡仙德%囌寧%王立新
장천상%곽례화%채선덕%소저%왕립신
FasL%反义RNA技术%Hep G2细胞%细胞凋亡
FasL%反義RNA技術%Hep G2細胞%細胞凋亡
FasL%반의RNA기술%Hep G2세포%세포조망
应用分子克隆技术将人FasL cDNA片段反向插入逆转录病毒载体pLXSN,构建重组质粒pL(hFasL-AS)SN,转染包装细胞PA317后获得FasL反义RNA重组逆转录病毒表达载体假病毒上清,经NIH3T3细胞检测其感染滴度后转染肝癌细胞株Hep G2细胞并筛选建系,命名为Hep G2-hFasL-AS.半定量RT-PCR检测显示Hep G2-FasL-AS细胞FasL的mRNA明显少于正常Hep G2细胞;FACS检测显示Hep G2-FasL-AS细胞FasL的表达与Hep G2细胞相比显著下降;同时,Hep G2-FasL-AS细胞导致HL-60细胞凋亡能力有所下降.表明人FasL反义RNA重组逆转录病毒表达载体能抑制转染细胞FasL的表达并下调其致凋亡功能.
應用分子剋隆技術將人FasL cDNA片段反嚮插入逆轉錄病毒載體pLXSN,構建重組質粒pL(hFasL-AS)SN,轉染包裝細胞PA317後穫得FasL反義RNA重組逆轉錄病毒錶達載體假病毒上清,經NIH3T3細胞檢測其感染滴度後轉染肝癌細胞株Hep G2細胞併篩選建繫,命名為Hep G2-hFasL-AS.半定量RT-PCR檢測顯示Hep G2-FasL-AS細胞FasL的mRNA明顯少于正常Hep G2細胞;FACS檢測顯示Hep G2-FasL-AS細胞FasL的錶達與Hep G2細胞相比顯著下降;同時,Hep G2-FasL-AS細胞導緻HL-60細胞凋亡能力有所下降.錶明人FasL反義RNA重組逆轉錄病毒錶達載體能抑製轉染細胞FasL的錶達併下調其緻凋亡功能.
응용분자극륭기술장인FasL cDNA편단반향삽입역전록병독재체pLXSN,구건중조질립pL(hFasL-AS)SN,전염포장세포PA317후획득FasL반의RNA중조역전록병독표체재체가병독상청,경NIH3T3세포검측기감염적도후전염간암세포주Hep G2세포병사선건계,명명위Hep G2-hFasL-AS.반정량RT-PCR검측현시Hep G2-FasL-AS세포FasL적mRNA명현소우정상Hep G2세포;FACS검측현시Hep G2-FasL-AS세포FasL적표체여Hep G2세포상비현저하강;동시,Hep G2-FasL-AS세포도치HL-60세포조망능력유소하강.표명인FasL반의RNA중조역전록병독표체재체능억제전염세포FasL적표체병하조기치조망공능.
