中国人兽共患病杂志
中國人獸共患病雜誌
중국인수공환병잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2004年
3期
180-182
,共3页
寇志华%张毅%郭瀛军%陈祖欢%施柯%孙树汉
寇誌華%張毅%郭瀛軍%陳祖歡%施柯%孫樹漢
구지화%장의%곽영군%진조환%시가%손수한
钩端螺旋体%内鞭毛蛋白%表达%包涵体
鉤耑螺鏇體%內鞭毛蛋白%錶達%包涵體
구단라선체%내편모단백%표체%포함체
目的在大肠杆菌中高效表达钩端螺旋体内鞭毛蛋白(FlaB)用于钩体病的诊断和预防.方法将目的基因flaB定向克隆至原核表达载体pGEX-5T,构建重组融合表达质粒pGF;Western-blot 鉴定其特异性,ELISA法判定其用于钩体病诊断的可行性.结果 GST-FlaB主要以包涵体形式表达,表达量约占菌体总蛋白的40%;Western-blot结果显示该蛋白与FlaB抗血清能呈现明显的单一条带;包涵体经Triton X-100及尿素纯化后,纯度可达90%,并且能溶于包被缓冲液中;ELISA检测显示纯化后的GST-FlaB具有较好的特异性.结论钩端螺旋体FlaB可以高效表达并可能用于ELISA检测及钩体病的预防.
目的在大腸桿菌中高效錶達鉤耑螺鏇體內鞭毛蛋白(FlaB)用于鉤體病的診斷和預防.方法將目的基因flaB定嚮剋隆至原覈錶達載體pGEX-5T,構建重組融閤錶達質粒pGF;Western-blot 鑒定其特異性,ELISA法判定其用于鉤體病診斷的可行性.結果 GST-FlaB主要以包涵體形式錶達,錶達量約佔菌體總蛋白的40%;Western-blot結果顯示該蛋白與FlaB抗血清能呈現明顯的單一條帶;包涵體經Triton X-100及尿素純化後,純度可達90%,併且能溶于包被緩遲液中;ELISA檢測顯示純化後的GST-FlaB具有較好的特異性.結論鉤耑螺鏇體FlaB可以高效錶達併可能用于ELISA檢測及鉤體病的預防.
목적재대장간균중고효표체구단라선체내편모단백(FlaB)용우구체병적진단화예방.방법장목적기인flaB정향극륭지원핵표체재체pGEX-5T,구건중조융합표체질립pGF;Western-blot 감정기특이성,ELISA법판정기용우구체병진단적가행성.결과 GST-FlaB주요이포함체형식표체,표체량약점균체총단백적40%;Western-blot결과현시해단백여FlaB항혈청능정현명현적단일조대;포함체경Triton X-100급뇨소순화후,순도가체90%,병차능용우포피완충액중;ELISA검측현시순화후적GST-FlaB구유교호적특이성.결론구단라선체FlaB가이고효표체병가능용우ELISA검측급구체병적예방.
