中国粮油学报
中國糧油學報
중국량유학보
JOURNAL OF THE CHINESE CEREALS AND OILS ASSOCIATION
2008年
3期
194-198
,共5页
张秀丰%苏旭东%张伟%袁耀武%周巍%张会彦%齐哲
張秀豐%囌旭東%張偉%袁耀武%週巍%張會彥%齊哲
장수봉%소욱동%장위%원요무%주외%장회언%제철
转基因%大豆%DNA提取%多重PCR%检测
轉基因%大豆%DNA提取%多重PCR%檢測
전기인%대두%DNA제취%다중PCR%검측
旨在建立一套准确、快速、可靠的用于转基因大豆检测及DNA提取方法;以35S启动予(Cauliflowermosaicvirus 35S, CaMV 35S)、Nos终止子(Nopalinesynthase, Nos)、NPTⅡ、CP4-EPSPS四种外源基因和大豆内源基因(Lectin)为检测的目的片段,建立五重PCR反应体系,并采用改进的方法提取DNA,进行PCR扩增,实际检测了已知转基因大豆和市售大豆;改进的DNA提取方法与经典的CTAB方法相比,提取时间至少缩短了1h,降低了提取成本.经过PCR扩增对五种外源基因进行了检测,经DNA测序证实了产物为目的扩增产物.转基因大豆的检出限为0.2%～0.5%.改进后的DNA提取方法能够快速提取用于PCR扩增的高质量模板,消除了PCR反应的抑制因子;建立的五重PCR反应体系能够高效、准确的检测转基因大豆.
旨在建立一套準確、快速、可靠的用于轉基因大豆檢測及DNA提取方法;以35S啟動予(Cauliflowermosaicvirus 35S, CaMV 35S)、Nos終止子(Nopalinesynthase, Nos)、NPTⅡ、CP4-EPSPS四種外源基因和大豆內源基因(Lectin)為檢測的目的片段,建立五重PCR反應體繫,併採用改進的方法提取DNA,進行PCR擴增,實際檢測瞭已知轉基因大豆和市售大豆;改進的DNA提取方法與經典的CTAB方法相比,提取時間至少縮短瞭1h,降低瞭提取成本.經過PCR擴增對五種外源基因進行瞭檢測,經DNA測序證實瞭產物為目的擴增產物.轉基因大豆的檢齣限為0.2%～0.5%.改進後的DNA提取方法能夠快速提取用于PCR擴增的高質量模闆,消除瞭PCR反應的抑製因子;建立的五重PCR反應體繫能夠高效、準確的檢測轉基因大豆.
지재건립일투준학、쾌속、가고적용우전기인대두검측급DNA제취방법;이35S계동여(Cauliflowermosaicvirus 35S, CaMV 35S)、Nos종지자(Nopalinesynthase, Nos)、NPTⅡ、CP4-EPSPS사충외원기인화대두내원기인(Lectin)위검측적목적편단,건립오중PCR반응체계,병채용개진적방법제취DNA,진행PCR확증,실제검측료이지전기인대두화시수대두;개진적DNA제취방법여경전적CTAB방법상비,제취시간지소축단료1h,강저료제취성본.경과PCR확증대오충외원기인진행료검측,경DNA측서증실료산물위목적확증산물.전기인대두적검출한위0.2%～0.5%.개진후적DNA제취방법능구쾌속제취용우PCR확증적고질량모판,소제료PCR반응적억제인자;건립적오중PCR반응체계능구고효、준학적검측전기인대두.
