中国生物化学与分子生物学报
中國生物化學與分子生物學報
중국생물화학여분자생물학보
CHINESE JOURNAL OF BIOCHEMISTRY AND MOLECULAR BIOLOGY
2008年
6期
556-562
,共7页
吴逸园%张立娟%朱蓉%陈素青%李晓雯%杨晓达%李载权
吳逸園%張立娟%硃蓉%陳素青%李曉雯%楊曉達%李載權
오일완%장립연%주용%진소청%리효문%양효체%리재권
糖调节蛋白78%固醇调节元件结合蛋白1%内质网应激%脂肪肝
糖調節蛋白78%固醇調節元件結閤蛋白1%內質網應激%脂肪肝
당조절단백78%고순조절원건결합단백1%내질망응격%지방간
为研究糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78, GRP78)对肝细胞脂肪变性的影响,采用四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)刺激人肝癌HepG2细胞,油红O染色证实,CCl4作用HepG2细胞后,细胞浆中脂肪颗粒明显增加,同时固醇调节元件结合蛋白1(sterol regulatory element binding protein 1, SREBP-1)蛋白水平和3羟3甲基戊二酸单酰CoA还原酶(HMGCoA还原酶)mRNA水平分别为对照组的1.55倍和1.70倍.构建人GRP78启动子荧光素酶报告基因载体pGL3/hGRP78P转染人肝癌HepG2细胞后,结果发现,CCl4促进GRP78基因转录,转录活性为诱导前的1.92倍.构建人GRP78 RNAi沉默质粒pSuper/GRP78转染人肝癌HepG2细胞后,该质粒能特异性沉默内源性GRP78;内源性GRP78沉默后的人肝癌HepG2细胞经CCl4诱导,HMGCoA还原酶mRNA和SREBP-1蛋白的表达较对照组进一步升高,分别为对照组的1.48倍和2.38倍;人肝癌HepG2细胞GRP78的体外过表达能降低CCl4介导的HMGCoA还原酶mRNA和SREBP-1蛋白诱导表达,分别为对照组的78.5%和51.5%;油红O染色进一步证实,GRP78过表达可明显减少脂肪颗粒在HepG2细胞浆中的集聚.综上表明,GRP78可抑制CCl4的SREBP-1和HMGCoA还原酶的诱导表达以及HepG2细胞脂肪变性,提示GRP78的表达增加在肝细胞脂肪变性损伤过程中具有潜在的保护作用.
為研究糖調節蛋白78(glucose regulated protein 78, GRP78)對肝細胞脂肪變性的影響,採用四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)刺激人肝癌HepG2細胞,油紅O染色證實,CCl4作用HepG2細胞後,細胞漿中脂肪顆粒明顯增加,同時固醇調節元件結閤蛋白1(sterol regulatory element binding protein 1, SREBP-1)蛋白水平和3羥3甲基戊二痠單酰CoA還原酶(HMGCoA還原酶)mRNA水平分彆為對照組的1.55倍和1.70倍.構建人GRP78啟動子熒光素酶報告基因載體pGL3/hGRP78P轉染人肝癌HepG2細胞後,結果髮現,CCl4促進GRP78基因轉錄,轉錄活性為誘導前的1.92倍.構建人GRP78 RNAi沉默質粒pSuper/GRP78轉染人肝癌HepG2細胞後,該質粒能特異性沉默內源性GRP78;內源性GRP78沉默後的人肝癌HepG2細胞經CCl4誘導,HMGCoA還原酶mRNA和SREBP-1蛋白的錶達較對照組進一步升高,分彆為對照組的1.48倍和2.38倍;人肝癌HepG2細胞GRP78的體外過錶達能降低CCl4介導的HMGCoA還原酶mRNA和SREBP-1蛋白誘導錶達,分彆為對照組的78.5%和51.5%;油紅O染色進一步證實,GRP78過錶達可明顯減少脂肪顆粒在HepG2細胞漿中的集聚.綜上錶明,GRP78可抑製CCl4的SREBP-1和HMGCoA還原酶的誘導錶達以及HepG2細胞脂肪變性,提示GRP78的錶達增加在肝細胞脂肪變性損傷過程中具有潛在的保護作用.
위연구당조절단백78(glucose regulated protein 78, GRP78)대간세포지방변성적영향,채용사록화탄(carbon tetrachloride, CCl4)자격인간암HepG2세포,유홍O염색증실,CCl4작용HepG2세포후,세포장중지방과립명현증가,동시고순조절원건결합단백1(sterol regulatory element binding protein 1, SREBP-1)단백수평화3간3갑기무이산단선CoA환원매(HMGCoA환원매)mRNA수평분별위대조조적1.55배화1.70배.구건인GRP78계동자형광소매보고기인재체pGL3/hGRP78P전염인간암HepG2세포후,결과발현,CCl4촉진GRP78기인전록,전록활성위유도전적1.92배.구건인GRP78 RNAi침묵질립pSuper/GRP78전염인간암HepG2세포후,해질립능특이성침묵내원성GRP78;내원성GRP78침묵후적인간암HepG2세포경CCl4유도,HMGCoA환원매mRNA화SREBP-1단백적표체교대조조진일보승고,분별위대조조적1.48배화2.38배;인간암HepG2세포GRP78적체외과표체능강저CCl4개도적HMGCoA환원매mRNA화SREBP-1단백유도표체,분별위대조조적78.5%화51.5%;유홍O염색진일보증실,GRP78과표체가명현감소지방과립재HepG2세포장중적집취.종상표명,GRP78가억제CCl4적SREBP-1화HMGCoA환원매적유도표체이급HepG2세포지방변성,제시GRP78적표체증가재간세포지방변성손상과정중구유잠재적보호작용.
