世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2009年
3期
241-246
,共6页
刘永靖%陈飞虎%苏长青%王星华%钱炎珍%钱其军
劉永靖%陳飛虎%囌長青%王星華%錢炎珍%錢其軍
류영정%진비호%소장청%왕성화%전염진%전기군
基因治疗%腺病毒%肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体%凋亡%肝细胞癌%四甲基偶氮唑蓝%流式细胞术
基因治療%腺病毒%腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體%凋亡%肝細胞癌%四甲基偶氮唑藍%流式細胞術
기인치료%선병독%종류배사인자상관조망유도배체%조망%간세포암%사갑기우담서람%류식세포술
目的: 评价携带TRAIL基因的肿瘤特异性增殖型腺病毒CNHK500-hTRAIL在人肝癌细胞株中介导TRAIL基因表达及对肝癌细胞的凋亡诱导作用.方法: CNHK500-hTRAIL感染人肝癌细胞株HepG2、Hep3B以及人正常肝细胞株WRL-68,通过增殖实验观察病毒的选择性增殖能力, 并进行酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TRAIL蛋白的表达量, 四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测其杀伤肝癌细胞的功效, 流式细胞术(FCM)检测其对细胞早期凋亡的影响.结果: CNHK500-h TRAI L能选择性地在HepG2、Hep3B细胞内高效增殖; 感染72 h后HepG2、Hep3B细胞培养上清中TRAIL的表达量分别为167.4、173.22 ng/L; 在MOI = 0.1时, CNHK500-hTRAIL即可明显杀伤HepG2、Hep3B细胞, 并选择性地诱导细胞早期凋亡,均显著高于空病毒CNHK500及非增殖型腺病毒Ad-hTRAIL; 而对人正常肝细胞株WRL-68则无明显杀伤作用.结论: 携带TRAIL基因的肿瘤特异性增殖型腺病毒载体对肿瘤细胞的杀伤能力和目的基因的表达, 明显优于单纯的病毒载体及传统的非增殖型腺病毒载体, 应用前景广阔.
目的: 評價攜帶TRAIL基因的腫瘤特異性增殖型腺病毒CNHK500-hTRAIL在人肝癌細胞株中介導TRAIL基因錶達及對肝癌細胞的凋亡誘導作用.方法: CNHK500-hTRAIL感染人肝癌細胞株HepG2、Hep3B以及人正常肝細胞株WRL-68,通過增殖實驗觀察病毒的選擇性增殖能力, 併進行酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測TRAIL蛋白的錶達量, 四甲基偶氮唑藍(MTT)比色法檢測其殺傷肝癌細胞的功效, 流式細胞術(FCM)檢測其對細胞早期凋亡的影響.結果: CNHK500-h TRAI L能選擇性地在HepG2、Hep3B細胞內高效增殖; 感染72 h後HepG2、Hep3B細胞培養上清中TRAIL的錶達量分彆為167.4、173.22 ng/L; 在MOI = 0.1時, CNHK500-hTRAIL即可明顯殺傷HepG2、Hep3B細胞, 併選擇性地誘導細胞早期凋亡,均顯著高于空病毒CNHK500及非增殖型腺病毒Ad-hTRAIL; 而對人正常肝細胞株WRL-68則無明顯殺傷作用.結論: 攜帶TRAIL基因的腫瘤特異性增殖型腺病毒載體對腫瘤細胞的殺傷能力和目的基因的錶達, 明顯優于單純的病毒載體及傳統的非增殖型腺病毒載體, 應用前景廣闊.
목적: 평개휴대TRAIL기인적종류특이성증식형선병독CNHK500-hTRAIL재인간암세포주중개도TRAIL기인표체급대간암세포적조망유도작용.방법: CNHK500-hTRAIL감염인간암세포주HepG2、Hep3B이급인정상간세포주WRL-68,통과증식실험관찰병독적선택성증식능력, 병진행매련면역흡부시험(ELISA)검측TRAIL단백적표체량, 사갑기우담서람(MTT)비색법검측기살상간암세포적공효, 류식세포술(FCM)검측기대세포조기조망적영향.결과: CNHK500-h TRAI L능선택성지재HepG2、Hep3B세포내고효증식; 감염72 h후HepG2、Hep3B세포배양상청중TRAIL적표체량분별위167.4、173.22 ng/L; 재MOI = 0.1시, CNHK500-hTRAIL즉가명현살상HepG2、Hep3B세포, 병선택성지유도세포조기조망,균현저고우공병독CNHK500급비증식형선병독Ad-hTRAIL; 이대인정상간세포주WRL-68칙무명현살상작용.결론: 휴대TRAIL기인적종류특이성증식형선병독재체대종류세포적살상능력화목적기인적표체, 명현우우단순적병독재체급전통적비증식형선병독재체, 응용전경엄활.
