国际检验医学杂志
國際檢驗醫學雜誌
국제검험의학잡지
INTERNATIONAL JOURNAL OF LABORATORY MEDICINE
2010年
12期
1361-1363
,共3页
核酸扩增技术%肝炎病毒,乙型%聚合酶链反应一步法%煮沸法%磁珠法
覈痠擴增技術%肝炎病毒,乙型%聚閤酶鏈反應一步法%煮沸法%磁珠法
핵산확증기술%간염병독,을형%취합매련반응일보법%자비법%자주법
目的 研究不同核酸提取方法在HBV DNA荧光定量检测中的提取效率、重复性、抗干扰性及对扩增试剂的兼容能力.方法 运用两种具有不同启动温度的Taq酶的扩增试剂分别扩增经一步法、煮沸法和磁珠法提取HBV DNA强阳性血清的模板,比较不同提取方法对扩增试剂的兼容能力.采用3种方法提取3份HBV DNA含量不同的标本各10次,进行扩增,比较不同方法的提取效率和重复性;对HBV DNA阳性标本用HBV DNA阴性的黄疸血清和溶血液进行10倍稀释后分别用前述方法提取进行干扰试验.结果 3种提取方法中,磁珠法和煮沸法提取的模板对两种扩增试剂具有良好的兼容性;重复性比较以一步法最佳,磁珠法次之,煮沸法较差;提取效率比较以磁珠法最理想,一步法次之,煮沸法最差;对黄疸和溶血的抗干扰能力以磁珠法最佳,溶血对煮沸法有一定影响,在无5-羧基-X-罗丹明(5-ROX)校正的情况下,黄疸对一步法影响较大,有5-ROX校正系统分析则可以消除这种影响.结论 磁珠法具有良好的重复性和提取效率,对黄疸和溶血有较强抗干扰能力,对扩增试剂的兼容性好,是一种理想的核酸提取方法;相对而言,一步法快捷且重复性更佳.
目的 研究不同覈痠提取方法在HBV DNA熒光定量檢測中的提取效率、重複性、抗榦擾性及對擴增試劑的兼容能力.方法 運用兩種具有不同啟動溫度的Taq酶的擴增試劑分彆擴增經一步法、煮沸法和磁珠法提取HBV DNA彊暘性血清的模闆,比較不同提取方法對擴增試劑的兼容能力.採用3種方法提取3份HBV DNA含量不同的標本各10次,進行擴增,比較不同方法的提取效率和重複性;對HBV DNA暘性標本用HBV DNA陰性的黃疸血清和溶血液進行10倍稀釋後分彆用前述方法提取進行榦擾試驗.結果 3種提取方法中,磁珠法和煮沸法提取的模闆對兩種擴增試劑具有良好的兼容性;重複性比較以一步法最佳,磁珠法次之,煮沸法較差;提取效率比較以磁珠法最理想,一步法次之,煮沸法最差;對黃疸和溶血的抗榦擾能力以磁珠法最佳,溶血對煮沸法有一定影響,在無5-羧基-X-囉丹明(5-ROX)校正的情況下,黃疸對一步法影響較大,有5-ROX校正繫統分析則可以消除這種影響.結論 磁珠法具有良好的重複性和提取效率,對黃疸和溶血有較彊抗榦擾能力,對擴增試劑的兼容性好,是一種理想的覈痠提取方法;相對而言,一步法快捷且重複性更佳.
목적 연구불동핵산제취방법재HBV DNA형광정량검측중적제취효솔、중복성、항간우성급대확증시제적겸용능력.방법 운용량충구유불동계동온도적Taq매적확증시제분별확증경일보법、자비법화자주법제취HBV DNA강양성혈청적모판,비교불동제취방법대확증시제적겸용능력.채용3충방법제취3빈HBV DNA함량불동적표본각10차,진행확증,비교불동방법적제취효솔화중복성;대HBV DNA양성표본용HBV DNA음성적황달혈청화용혈액진행10배희석후분별용전술방법제취진행간우시험.결과 3충제취방법중,자주법화자비법제취적모판대량충확증시제구유량호적겸용성;중복성비교이일보법최가,자주법차지,자비법교차;제취효솔비교이자주법최이상,일보법차지,자비법최차;대황달화용혈적항간우능력이자주법최가,용혈대자비법유일정영향,재무5-최기-X-라단명(5-ROX)교정적정황하,황달대일보법영향교대,유5-ROX교정계통분석칙가이소제저충영향.결론 자주법구유량호적중복성화제취효솔,대황달화용혈유교강항간우능력,대확증시제적겸용성호,시일충이상적핵산제취방법;상대이언,일보법쾌첩차중복성경가.
