中药材
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중약재
JOURNAL OF CHINESE MEDICINAL MATERIALS
2004年
8期
585-589
,共5页
骨髓间质干细胞%神经元%香丹注射液%细胞分化
骨髓間質榦細胞%神經元%香丹註射液%細胞分化
골수간질간세포%신경원%향단주사액%세포분화
目的:研究香丹注射液对成年SD大鼠骨髓间质干细胞(rMSCs)的诱导分化作用.方法:rMSCs取自大鼠的下肢骨,贴壁筛选法和营养缺陷培养基(α-MEM完全培养液)分离纯化.加碱性成纤维生长因子(bFGF)预诱导第5代的rMSCs 24 h,换无血清培养液(D/F12+N2+bFGF)和香丹注射液(1%～5%)诱导6～8 h,观察细胞形态变化;细胞免疫化学和反转录-PCR法鉴定神经元标记物(神经元特异性烯醇化酶NSE、神经丝蛋白NF-200、微管相关蛋白MAP-2及胶质纤维酸性蛋白GFAP)的表达及相对表达量,并得到相应的诱导率.结果:诱导3 h,rMSCs出现神经元样的形态学变化,诱导6～8h,神经元的诱导率达83.5%±3.8%;诱导组中,神经元样细胞NSE、NF和GFAP的阳性率分别为82.9%±2.98%、84.1%±4.45%、3.49%±1.67%;对照组细胞和诱导组未变化细胞上述染色均呈阴性;RT-PCR法示:只有诱导组有NSE、MAP-2(HWM)、GFAP的表达且前两者的表达量均分别高于后者(P＜0.01).结论:1%～5%香丹注射液在体外能定向诱导rMSCs分化为神经元样细胞.
目的:研究香丹註射液對成年SD大鼠骨髓間質榦細胞(rMSCs)的誘導分化作用.方法:rMSCs取自大鼠的下肢骨,貼壁篩選法和營養缺陷培養基(α-MEM完全培養液)分離純化.加堿性成纖維生長因子(bFGF)預誘導第5代的rMSCs 24 h,換無血清培養液(D/F12+N2+bFGF)和香丹註射液(1%～5%)誘導6～8 h,觀察細胞形態變化;細胞免疫化學和反轉錄-PCR法鑒定神經元標記物(神經元特異性烯醇化酶NSE、神經絲蛋白NF-200、微管相關蛋白MAP-2及膠質纖維痠性蛋白GFAP)的錶達及相對錶達量,併得到相應的誘導率.結果:誘導3 h,rMSCs齣現神經元樣的形態學變化,誘導6～8h,神經元的誘導率達83.5%±3.8%;誘導組中,神經元樣細胞NSE、NF和GFAP的暘性率分彆為82.9%±2.98%、84.1%±4.45%、3.49%±1.67%;對照組細胞和誘導組未變化細胞上述染色均呈陰性;RT-PCR法示:隻有誘導組有NSE、MAP-2(HWM)、GFAP的錶達且前兩者的錶達量均分彆高于後者(P＜0.01).結論:1%～5%香丹註射液在體外能定嚮誘導rMSCs分化為神經元樣細胞.
목적:연구향단주사액대성년SD대서골수간질간세포(rMSCs)적유도분화작용.방법:rMSCs취자대서적하지골,첩벽사선법화영양결함배양기(α-MEM완전배양액)분리순화.가감성성섬유생장인자(bFGF)예유도제5대적rMSCs 24 h,환무혈청배양액(D/F12+N2+bFGF)화향단주사액(1%～5%)유도6～8 h,관찰세포형태변화;세포면역화학화반전록-PCR법감정신경원표기물(신경원특이성희순화매NSE、신경사단백NF-200、미관상관단백MAP-2급효질섬유산성단백GFAP)적표체급상대표체량,병득도상응적유도솔.결과:유도3 h,rMSCs출현신경원양적형태학변화,유도6～8h,신경원적유도솔체83.5%±3.8%;유도조중,신경원양세포NSE、NF화GFAP적양성솔분별위82.9%±2.98%、84.1%±4.45%、3.49%±1.67%;대조조세포화유도조미변화세포상술염색균정음성;RT-PCR법시:지유유도조유NSE、MAP-2(HWM)、GFAP적표체차전량자적표체량균분별고우후자(P＜0.01).결론:1%～5%향단주사액재체외능정향유도rMSCs분화위신경원양세포.
