免疫学杂志
免疫學雜誌
면역학잡지
IMMUNOLOGICAL JOURNAL
2006年
1期
98-100,103
,共4页
杨楠%姚密河%张桂荣%杨翰仪
楊楠%姚密河%張桂榮%楊翰儀
양남%요밀하%장계영%양한의
色素上皮细胞衍生因子%克隆%表达%载体
色素上皮細胞衍生因子%剋隆%錶達%載體
색소상피세포연생인자%극륭%표체%재체
目的构建色素上皮细胞衍生因子(PEDF)的表达载体.方法从孕8周的胚胎绒毛中提取总RNA,经RT-PCR扩增,获得编码人PEDF的全基因序列,采用T-A克隆法,将PEDF基因克隆入PMD18-T中间载体并转化入大肠杆菌E.coliJM109中,提取重组质粒并酶切鉴定,将鉴定正确的质粒命名为PMD18-T/PEDF,DNA测序,测序正确后构建重组表达载体pET28a/PEDF,转化大肠杆菌E.coli DH5α并酶切鉴定.结果重组表达载体pET28a/PEDF在大肠杆菌E.coli DH5α中克隆表达.结论构建了PEDF重组表达载体pET28a/PEDF,为重组PEDF的进一步表达及纯化奠定了基础.
目的構建色素上皮細胞衍生因子(PEDF)的錶達載體.方法從孕8週的胚胎絨毛中提取總RNA,經RT-PCR擴增,穫得編碼人PEDF的全基因序列,採用T-A剋隆法,將PEDF基因剋隆入PMD18-T中間載體併轉化入大腸桿菌E.coliJM109中,提取重組質粒併酶切鑒定,將鑒定正確的質粒命名為PMD18-T/PEDF,DNA測序,測序正確後構建重組錶達載體pET28a/PEDF,轉化大腸桿菌E.coli DH5α併酶切鑒定.結果重組錶達載體pET28a/PEDF在大腸桿菌E.coli DH5α中剋隆錶達.結論構建瞭PEDF重組錶達載體pET28a/PEDF,為重組PEDF的進一步錶達及純化奠定瞭基礎.
목적구건색소상피세포연생인자(PEDF)적표체재체.방법종잉8주적배태융모중제취총RNA,경RT-PCR확증,획득편마인PEDF적전기인서렬,채용T-A극륭법,장PEDF기인극륭입PMD18-T중간재체병전화입대장간균E.coliJM109중,제취중조질립병매절감정,장감정정학적질립명명위PMD18-T/PEDF,DNA측서,측서정학후구건중조표체재체pET28a/PEDF,전화대장간균E.coli DH5α병매절감정.결과중조표체재체pET28a/PEDF재대장간균E.coli DH5α중극륭표체.결론구건료PEDF중조표체재체pET28a/PEDF,위중조PEDF적진일보표체급순화전정료기출.
