北京理工大学学报
北京理工大學學報
북경리공대학학보
JOURNAL OF BEIJING INSTITUTE OF TECHNOLOGY
2008年
2期
181-184
,共4页
赵东旭%靳莎%姜佳君%王松%李茂林%朱鹤荪
趙東旭%靳莎%薑佳君%王鬆%李茂林%硃鶴蓀
조동욱%근사%강가군%왕송%리무림%주학손
反义核酸%血管性血友病因子%血管内皮细胞
反義覈痠%血管性血友病因子%血管內皮細胞
반의핵산%혈관성혈우병인자%혈관내피세포
为降低在血栓形成早期血管内皮细胞分泌的血管性血友病因子(vWF)对凝血级联反应的触发效应,利用反义核酸技术构建降低vWF表达量的血管内皮细胞.人工合成vWF部分反义核酸(pvWF),构建重组的真核表达载体pcDNA3.1(+)/pvWF.测序正确后用脂质体介导的方法转染血管内皮细胞,硫酸新霉素加压筛选后扩大培养转基因细胞,RT-PCR法检测转基因细胞中vWF mRNA的表达水平.结果表明,构建的vWF反义核酸真核表达载体能有效抑制细胞中vWF mRNA的表达,为新型抗凝血材料的研究提供一种基因改造的内皮细胞.
為降低在血栓形成早期血管內皮細胞分泌的血管性血友病因子(vWF)對凝血級聯反應的觸髮效應,利用反義覈痠技術構建降低vWF錶達量的血管內皮細胞.人工閤成vWF部分反義覈痠(pvWF),構建重組的真覈錶達載體pcDNA3.1(+)/pvWF.測序正確後用脂質體介導的方法轉染血管內皮細胞,硫痠新黴素加壓篩選後擴大培養轉基因細胞,RT-PCR法檢測轉基因細胞中vWF mRNA的錶達水平.結果錶明,構建的vWF反義覈痠真覈錶達載體能有效抑製細胞中vWF mRNA的錶達,為新型抗凝血材料的研究提供一種基因改造的內皮細胞.
위강저재혈전형성조기혈관내피세포분비적혈관성혈우병인자(vWF)대응혈급련반응적촉발효응,이용반의핵산기술구건강저vWF표체량적혈관내피세포.인공합성vWF부분반의핵산(pvWF),구건중조적진핵표체재체pcDNA3.1(+)/pvWF.측서정학후용지질체개도적방법전염혈관내피세포,류산신매소가압사선후확대배양전기인세포,RT-PCR법검측전기인세포중vWF mRNA적표체수평.결과표명,구건적vWF반의핵산진핵표체재체능유효억제세포중vWF mRNA적표체,위신형항응혈재료적연구제공일충기인개조적내피세포.
